Effect of egg yolk of four avian species on the cryopreserved ram spermatozoa

زرده‌ي تخم مرغ يکي از رايج‌ترين ترکيبات براي محافظت اسپرم در خلال فرآيندهاي يخ زدن و يخ گشايي است. هدف اين آزمايش، مقايسه اثر محافظتي زرده‌ي تخم چهار گونه پرنده (مرغ، اردک، بوقلمون و کبوتر)، براي محافظت اسپرم قوچ در برابر آسيب‌هاي يخ زدن بود. نمونه‌هاي مني از 6 قوچ با تحريک الکتريکي جمع‌آوري شدند. نمونه‌ها با رقيق کننده تريس-سيتريک اسيد-فروکتوز که داراي زرده‌ي تخم پرندگان مختلف (15%) و گليسرول (5%) بودند، آميخته و رقيق و در استراهاي 5/0 ميلي‌ليتري در نيتروژن مايع يخ‌ زده شدند. پس از يخ گشايي، جنبايي پيش‌رونده و درصد اسپرم زنده يا مرده و سلامت آکروزوم با روش رنگ‌آميزي ائوزين-نيگروزين و گيمسا، بي‌درنگ پس از يخ گشايي، و 2 و 4 ساعت پس از يخ گشايي ارزيابي شد. جنبايي پيش‌رونده، درصد اسپرم زنده و سلامت آکروزوم در رقيق کننده داراي زرده‌ي تخم کبوتر در مقايسه با رقيق کننده‌هاي داراي زرده‌ي تخم بوقلمون، اردک و مرغ به طور معني‌داري (P<0.05) بالاتر بود، اما با پيشرفت زمان پس از يخ گشايي به طور معني‌داري کاهش يافت. برهم کنش بين زمان پس از يخ گشايي و نوع زرده معني‌دار نبود. نتايج نشان داد که زرده‌ي تخم کبوتر در مقايسه با زرده‌ي تخم مرغ، اثر محافظتي بهتري براي اسپرم قوچ دارد ولي نياز به ارزيابي‌هاي باروري بيشتري است.

Egg yolk is the most commonly used cryoprotective agent for sperm cryopreservation of several species. The objective of this experiment was to compare the effectiveness of egg yolk from four avian species (domestic chicken, duck, turkey and pigeon) on sperm quality following cryopreservation of the ram semen. Ejaculates were collected, using an electroejaculator, from six fertile rams. Samples were diluted in a tris-citric acid-fructose extender containing egg yolk (15%) and glycerol (5%). Diluted samples were cooled slowly to 5 C over 2 h and equilibrated at that temperature for 2 h. Aliquots of samples were loaded into 0.5 ml straws and frozen in liquid nitrogen vapor for 15 min and stored in liquid nitrogen. Post-thaw progressive motility, live/dead ratio and acrosomal integrity of 200 sperm per slide stained with eosin-nigrosin and giemsa, were evaluated at 0, 2 and 4 h after thawing. Pigeon egg yolk had the most cryoprotective effect in terms of progressive motility, livability and acrosomal integrity (P<0.05). There was a significant decrease (P<0.05) in progressive motility, livability and acrosomal integrity up to 4 h after thawing. The results indicated that pigeon egg yolk might be superior to chicken egg yolk for cryopreservation of ram spermatozoa in tris-citric acid-fructose yolk extender, however, further experiments are needed to evaluate its effects on fertility.