معرفي نشانگرهاي ژنتيكي شناسايي جمعيت سه گونه ماهي سفيد،سس ماهي وماهي سيم درياي خزربه روش PCR - RFLP

در اين تحقيق سه گونه از كپور ماهيان Cyprinidae ( سفيد Rutilus frisii kutum ، سيم Abramis brama و سس Barbus capito ) در سواحل مركزي حوضه جنوبي درياي خزر مورد مطالعه قرار گرفت . جهت استخراج DNA نمونه ها از باله ماهي به روش فنـل – كـلروفرم استفـاده شـده است و طبـق تـوالي نـوكـلئو تيـدهـاي ژن سيتـوكـروم b مـاهي كـلمه Rutilus rutilus caspicus يك جفت پرايمر طراحي شد كه در نتيجه آن محصولPCR به طول bp1117 بدست آمد. جهت هضم آنزيمي محصول PCR از آنزيم هايAlu I , BamH I, Rsa I , Alw26I , Dpn I , Eco47 I , HhaI , Hae III , Hinc II , Hinf I , Msp I , Taq I,و Mbo I استفاده شد. الگو هاي الكتروفورزي حاصل از هضم آنزيمي محصول PCR در مورد آنزيم هاي Hha I, Mbo I, Hinf I، Rsa I و آنزيم Hinc II سه نوع ژنوتيپ و ساير آنزيمها ژنوتيپ يكساني را نشان دادند. در اين تحقيق از نرم افزارهاي REAP و PAUPجهت تجزيه و تحليل آماري داده ها استفاده شده است. بر اساس داده هاي حاصله، فاصله تكاملي بين سس و سيم ، 0.2523 ،بين سيم و سفيد 1782/0 و بين سس و سفيد 3500/0 بود. با مقايسه اطلاعات مشاهده ميشود كه بيشترين فاصله تكاملي بين ماهي سفيد و سس بوده و كمترين فاصله بين سيم و سفيد بوده است. آزمون شبيه سازي Mont – Carlo(2test) بر اساس تشابه و يا عدم تشابه ژنتيكي گونه هاي مورد مطالعه با 1000 مرتبه شبيه سازي ، اختلاف معني داري بين گونه ها نشان داد( P 0.0001 ) . علاوه بر اين كلادوگرامهاي حاصل از آناليز داده هاي مولكولي بر اساس مدل UPGMA ترسيم شده كه با موازنه يكسان تمام صفات نوكلئوتيدي و آناليز 46 صفت ، چهار كلاد.وگرام حاصل شد كه با تلفيق اين كلادوگرامها ، درخت مركزي بدست آمد.