توليد Lgy برمبناي DNA در طيور، پلي جديد بين ژنوميكس و پروتئوميكس

آنتيبادي Lgy برمبناي DNA، به توليد آنتيبادي Lgy بوسيله ايمن كردن ژنتيكي طيور گفته ميشود. در اين مطالعه از پروتئين انترفرن گاماي نوتركيب (rBoIFN-y) و پروتئين شوك حرارتي 70 نوتركيب (rHSP70) باكتري مايكوباكتريوم آويوم به عنوان مدل ي پروتئيني ، يوكاريوتي و پروكاريوتي، براي توليد آنتيبادي در مرغ مورد استفاده قرار گرفت. ژن هاي مربوطه بعد از همسانه سازي به پلاسميد بياني (+) pcDNA3.1 انتقال يافت. بيان ژن rBOIFN-y و rHSP70 در شرايط آزمايشگاهي با انجام آزمون اليزاي ساندويچ و RT-PCR تاييد گرديد. مرغها بوسيله پلاسميدهاي نوتركيب ايمن شدند، و آنتيباديهاي زرده از تخم مرغهاي جمع آوري شده استخراج گرديد. در نهايت اقدام به تاييد Lgy اختصاصي توليد شده بر ضد پروتئينهاي نوتركيب توليدي در كشت سلول (COS-7) بوسيله آزمون وسترن بلاتينگ شد. برمبناي نتايج بدست آمده ، حداكثر بيان rBOIFN-y در زمانهاي 96 و 144 ساعت بعد از ترانسفكشن در مايه رويي كشت سلول رخ داد و وجود باند 780 جفت بازي در RT-PCR بيان ژن rHSP70 را تاييد نمود. باندهاي 19/4 و 70 كيلو دالتن (KDa) در آزمون وسترن بلاتينگ، به ترتيب نشان دهنده توليد آنتيبادي Lgy اختصاصي rBOIFN-y و rHSP70 است. باتوجه به نتايج فوق مشخص گرديد، آنتيباديهاي توليد شده در مرغ، براي ارزيابي پروتئينهاي نوتركيب بيان شده در كشت سلولي مفيد ميباشد.