تعيين توالي و بررسي خصوصيات مولكولي ژن بتا 1و 4اندوگلوكاناز سويهBacillus subtilis B5d

Nucleotide sequence and molecular characterization a of β-1, 4- endoglucanase gene from Bacillus subtilis strain B5d

اين پژوهش به منظور تعيين برخي ويژگي هاي كاتاليتيكي و خصوصيات مولكولي ژن كدكنندهآنزيم بتا 1و 4اندوگلوكاناز در سويه Bacillus subtilis B5d انجام شد. ژن كدكننده اين آنزيمدر سويه B5d توسط آغازگرهاي اختصاصي تكثير، تعيين توالي و در پايگاه اطلاعاتي NCBI ثبتشد. تجزيه توالي حاصله و رسم درخت فيلوژني با استفاده از نرم افزار Vector NTIو Mega.4انجام شد. براساس نتايج حاصله قطعه تعيين توالي شده شامل 794نوكليوتيد بود كه يك رشتهپپتيدي با 264اسيدآمينه را كد ميكند. تجزيه توالي آمينواسيدي اين ژن در سويه مورد بررسينشانداد كه آنزيم اندوبتاگلوكاناز توليدشده توسط سويه مورد پژوهش چندبخشي بوده كه قسمتباند شونده به سلولز (Cellulose Binding Domain, CBD)آن مربوط به خانوادهگليكوزيدهيدرولاز 3و قسمت كاتاليك(CD)آنزيم مورد بررسي متعلق به خانوادهگليكوزيدهيدرولاز 5است. همچنين فعاليت آنزيم بتا 1و 4اندوگلوكاناز توليد شده توسط سويه ،B5dدر محدوده دمايي 30-70درجه سانتيگراد و 4/6 pH مورد بررسي قرار گرفت. نتايجنشان داد كه بيشترين فعاليت كاتاليتيك آنزيم بتا 1و 4اندوگلوكاناز در دماي 55درجه سانتيگرادبوده كه 461/83 U/L برآورد شد. بررسي پايداري آنزيم در شرايط دمايي و pH هاي مختلفنشانداد كه تا دماي 60 درجه سانتيگراد و در محدوده 5-10 pH آنزيم پايداري بهتري دارد