مطالعات سينتيكي آنزيم پراكسيداز در حضور حلال‌هاي آلي اتانول و بوتانديول

Kinetics studies of peroxidase enzyme in the presence of organic solvents ethanol and butanediol

پراكسيدازها (EC.1.11.1.7) گروهي از آنزيم‌هاي اكسيد و ردوكتازها هستند كه توسط تعدادي از ميكروارگانيسم‌ها و گياهان توليد مي‌شوند و احياي پراكسيدها را كاتاليز مي‌كنند. پراكسيدازها به‌طور وسيعي در بيوشيمي باليني و آزمايشات ايمني‌شناسي آنزيمي استفاده مي‌شوند. ايزوآنزيم C پراكسيداز ترب كوهي (HRPC) يكي از متداول‌ترين پراكسيدازهاي شناخته شده است ساختار اين آنزيم به‌طور غالب داراي مارپيچ آلفا است. مطالعات سينتيكي آنزيم پراكسيداز با استفاده از دستگاه اسپكتروفتومتر UV-Vis مجهز به سيستم كنترل الكترونيكي در دماي oC35 و oC45 و در 4 pH و در حضور اتانول و بوتانديول انجام گرفت. بررسي پارامترهاي سينتيكي نشان مي‌دهند كه حلال‌هاي آلي اتانول و بوتانديول باعث افزايش سرعت ماكسيمم (VMAX) و فعاليت آنزيم پراكسيداز مي‌شوند. حلال‌هاي آلي بر ميان كنش‌هاي الكتروستاتيك پروتئين‌ها اثر مي‌گذارند چرا كه ثابت دي الكتريك آن‌ها با آب متفاوت است. به‌طور كلي كاهش خاصيت قطبي حلال و كاهش ثابت دي‌الكتريك سبب افزايش دافعه الكتروستاتيك شده و منجر به باز شدن پروتئين‌ها مي‌شود. فعاليت آنزيم‌ها در چنين محيط‌هاي آلي باعث افزايش پايداري، فعاليت يا تسهيل واكنش‌هايي مي‌شود كه در محيط‌هاي آبي به سختي انجام مي‌شود.

Peroxidases are a group of oxidoreductases that are produced by a number of microorganisms and plants, and catalyse the reduction of peroxides. Peroxidases are widely used in clinical biochemistry and enzyme immunoassay. Horseradish peroxidase isoenzyme C (HRP) is one of the characterized peroxidases. The structure of the enzyme is largely alpha helical. Kinetics studies of peroxidase enzyme were performed using a spectrophotometer UV-Vis fitted with electronic control system at 35oC and 45oC and pH4 and in the presence ethanol and butanediol. Kinetic parameters show that ethanol and butanediol organic solvents becomes caused the increase of maximum speed (VMAX) and activity of the enzyme. Organic solvents have effect on electrostatic interactions of proteins because their dielectric constant with water is different. In general, reduce properties of polarsolvents and decreased dielectric constant becomes caused the increases electrostatic repulsion, leading to the opening of the proteins. Enzymes activity in such organic environments increases stability, activity or facilitate reactions that are difficult to perform in aquatic environments.