مطالعه تاثير برخي شرايط حاد محيطي بر ميزان بيان پروتئين Hsp70 نوتركيب كبد ماهي Rutilus Frissi Kutum در باكتري E. coli

هدف: هدف مطالعه حاضر بررسي بيان بهينه Hsp70 نوتركيب كبد ماهي Rutilus Frissi Kutum در باكتري E. coli مي باشد.مواد و روش‏ها: به‏منظور بررسي ميزان بيان پروتئين Hsp70 نوتركيب، باكتري E. coli ترانسفورم شده در محيط LB در زمان‏هاي 2، 4، 8، 12، 24، 36 و 48 ساعت، دماهاي 20، 25، 30، 37، 45 و 50 درجه سانتي‏گراد، شرايط pH افراطي (5 و 9) و نيز در حضور فلزات سنگين همانند نقره، كبالت، آهن، كروم، جيوه، سرب، روي، كادميوم، منگنز و نيكل كشت داده شد سپس با تهيه ي عصاره ي سلولي، ميزان بيان Hsp70 با استفاده از SDSPAGE  12 درصد مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت و رنگ آميزي با كوماسي بلو صورت گرفت.نتايج: بيان بهينه پروتئين Hsp70 نوتركيب در زمان 4 و 8  ساعت، دماي 37 درجه سانتي‏گراد و  pH برابر 5 صورت گرفت. به‏علاوه در حضور نمك هاي فلزات منگنز و كبالت، به‏ترتيب بيشترين و كمترين ميزان بيان پروتئين نوتركيب مشاهده شد. همچنين E. coli داراي Hsp70 در مقايسه با باكتري كنترل، نسبت به NaCl تحمل و رشد بيشتري دارد.نتيجه گيري: همه  نتايج حاصل از مطالعه نشان مي دهد باكتري ترانسفورم شده در مقايسه با باكتري كنترل به‏دليل دارا بودن  Hsp70 نوتركيب در برابر شرايط حاد محيطي قادر به بقا بوده است. پروتئين Hsp70 نوتركيب با خاصيت چاپروني خود از واسرشت شدن پروتئين هاي حياتي جلوگيري كرد است. بنابراين شرايط رشد توصيف شده در اين مطالعه مي تواند براي توليد بهينه پروتئين Hsp70 نوتركيب در ميزبان E. coli استفاده گردد.