بهينه‌سازي توليد آنزيم آميلاز در باكتري مقاوم به سرماي sp. ATR812 Janthinobacterium با استفاده از روشResponse Surface Methodology

Optimization of amylase enzyme production by a psychrothrophic Janthinobacterium sp. ATR812 with Response Surface Methodology

آميلاز (EC 3.2.1.1) يكي از مهم‌ترين آنزيم هاي صنعتي است كه كاربردهاي گسترده‌اي در صنايع مختلف دارد. اين آنزيم پيوند گليكوزيدي (4-1) α را در نشاسته هيدروليز كرده و محصولاتي با وزن مولكولي كمتر مثل گلوكز، مالتوز و مالتوتريوز توليد مي‌كند. هدف از انجام اين پژوهش بهينه‌سازي شرايط رشد و توليد آنزيم آميلاز در باكتري مقاوم به سرماي sp. Janthinobacterium مي‌باشد. شرايط رشد و توليد آنزيم آميلاز در مرحله اول با استفاده از روش تك متغيره براي متغيرهاي دما،pH ، منبع كربن، منبع نيتروژن، درصد نشاسته و ميزان تلقيح بهينه‌سازي شد. در مرحله بعدي به منظور بررسي اثر برهم كنش بين متغيرهاي مختلف بهينه متغيرسازي به روش طراحي روي سطح پاسخ (Response Surface Methodology) صورت گرفت. شناسايي مولكولي جدايه با استفاده از ژن S rRNA16 نشان داد كه باكتري به جنس Janthinobacterium تعلق دارند. روش تك متغيره نشان داد كه متغيرهاي دما، pH و درصد نشاسته بيشترين تاثير را در توليد آنزيم دارا مي‌باشند. مقايسه شرايط قبل و بعد از بهينه سازي نيز مشخص مي‌سازد كه ميزان توليد انزيم از 094/0 به 116/0 واحد آنزيمي افزايش مي‌يابد. در نتيجه اعمال شرايط بهينه شده با استفاده از روش RSM، ترشح آنزيم به ميزان 434/0 واحد آنزيمي افزايش پيدا مي‌كند.