بررسي اثر نوع آنزيم و زمان هيدروليز برتوليد پپتيدهاي آنتي اكسيدان از پروتئين اسپيرولينا پلاتنسيس

شرايط هيدروليز آنزيمي پروتئين ها شامل نوع آنزيم، زمان هيدروليز و درجه هيدروليز بر فعاليت زيستي محصول هيدروليز پروتئين تاثير گذار است. هدف از تحقيق حاضر، بررسي اثر شرايط هيدروليز آنزيمي بوسيله آنزيم هاي پپسين ،كيموتريپسين و تركيب دو آنزيم (نسبت آنزيم به سوبستراي 1:10، زمان 5 ساعت، دماي 37 درجه سانتي‌گراد) بر ميزان توليد پپتيدهاي آنتي اكسيدان از پروتئين ريزجلبك اسپيرولينا پلاتنسيس استخراج شده با روش سونيكاسيون (200 وات ، 20 كيلوهرتز، زمان 5 دقيقه) بود. ميزان پيشرفت هيدروليز آنزيمي با روش(OPA) O-phethaldialdehyde و فعاليت آنتي اكسيداني محصول هيدروليز پروتئين، بر اساس دو مكانيسم مهاركنندگي راديكال‌هاي DPPH و ABTS در طي زمان هيدروليز بررسي شدند. مقدار گروه‌هاي آمين آزاد بعد از 5 ساعت هيدروليز از مقدار 3.272 ميكرومول لوسين/ميلي گرم پروتئين به مقادير 3.653 و 4.522 و 3.713 به ترتيب براي آنزيم هاي پپسين، كيموتريپسين و تركيب دو آنزيم رسيد. فعاليت آنتي اكسيداني محصول هيدروليز پروتئيني در طي زمان هيدروليز افزايش يافت. بطوريكه فعاليت مهاركنندگي راديكال هاي DPPH و ABTS بعد از 150 دقيقه هيدروليز بوسيله پپسين به ترتيب به مقادير 23 و 110 ميكرومول ترولوكس/ ميلي گرم پروتئين رسيد. درحاليكه هيدروليز بوسيله آنزيم كيموتريپسين فعاليت آنتي اكسيداني را بعد از 120 دقيقه به ترتيب به مقادير 18 و 159 ميكرومول ترولوكس/ميلي گرم پروتئين رساند و تركيب دو انزيم باعث افزايش فعاليت مهار كنندگي DPPH تا مقدار 25 ميكرومول ترولوكس/ ميلي گرم پروتئين (بعد از 90 دقيقه) و مهاركنندگي ABTS تا مقدار 230 ميكرومول ترولوكس/ ميلي گرم پروتئين (بعد از 210 دقيقه) شد بطور كلي نتايج نشان دادند كه هيدروليز پروتئين ريزجلبك اسپيرولينا پلاتنسيس بوسيله آنزيم‌هاي پپسين و كيموتريپسين و تركيب دو آنزيم باعث توليد پپتيدهاي آنتي اكسيدان مي شود و آنزيم كيموتريپسين آنزيم موثرتري از پپسين و استفاده از تركيب دو آنزيم پپسين و كيموتريپسين موثرتر از استفاده تكي از آنزيم هاست.