كمي سازي توزيع مولكول‌هاي فام ساز نزديك به سطح در تصويربرداري با ميكروسكوپ فلورسانسِ بازتاب-داخلي-كلي

Quantification of Superficial Distribution of Fluorophores in a Total-Internal-Reflection Fluorescence Microscope

ميكروسكوپِ فلورسانسِ بازتاب-داخلي-كلي ابزاري كارا، براي مشاهده و ثبت پديده­هاي رخ داده در فاصله­اي كمتر از صد نانومتر است. از اين ويژگي منحصر بفرد ميكروسكوپ، براي بررسي "كيفي" اسكلت سلولي، در نزديكي سطح زيرينِ سلول استفاده مي­شود. در اين مقاله، توزيع اكتين­ها در فاصله­ي كمتر از صد نانومتري از سطحِ تماسِ سلول با بستر زيرين، با استفاده از ميكروسكوپِ فلورسانسِ بازتاب-داخلي-كلي برپايه ي منشور، تصويربرداري شده است. كمي­سازي اكتين­هاي اسكلت سلولي براي بررسي خزيدن سلول‌ها از لحظه اتصال اوليه به بستر زيرين تا آغاز حركت از اهميت بالايي برخوردار است؛ بدين­جهت در اين مقاله، با استفاده از محاسبه توزيع سطحي-حجمي مولكول­هاي فام­ساز، روشي براي "كمي­سازي" توزيع مولكول­هاي فام­ساز در نزديكيِ سطح زيرين سلول، ارايه شده است. اين روش جديد، امكان مطالعه خزيدن سلول براساس تصويربرداري لحظه­اي از سطح سلول را از طريق محاسبه توزيع موضعي مولكول­هاي فام­ساز در آن ناحيه فراهم مي­كند.

Total-Internal-Reflection Fluorescence Microscopy (TIRFM) is a useful tool to visualize and record the phenomena that happen below 100 nm thickness of the sample surface. This unique property of TIRFM helps to perform a qualitative study of cytoskeleton near the cell-substrate contact. Here, by staining the actins filaments of the human melanoma cell and implementing the prism-based totalinternal- reflection fluorescence microscope, a method to quantify distribution of fluorophores at cell-substrate contact is proposed.