توليد آنتي‌ژن پلي‌اپي‌توپي نوتركيب HPV16-E6: بررسي اثر سويه‌ها و شرايط محيطي متفاوت

مقدمه: سرطان دهانه رحم با حدود 528000 مورد بيمار و 266000 مرگ در سال، يكي از سرطان‌هاي رايج در بين زنان جهان به شمار مي‌رود و عفونت پايدار با ويروس پاپيلوماي انساني ((HPV عامل اصلي آن است. واكسن‌هاي مبتني بر پپتيد مشتق‌شده از دو پروتئين انكوژن E6 و E7 به‌علت ايمني و پايداري بالا و سهولت در توليد، پتانسيل بالايي براي توليد واكسن درماني HPV نشان داده‌اند. در اين مطالعه اثر سويه‌هاي مختلف اشرشياكلي در كنار پارامترهاي محيطي ازجمله دما، زمان القايي و غلظت القاكننده بر ميزان بيان پروتئين پلي اپي‌توپ نوتركيبHPV16E6  بررسي مي‌شود. مواد و روش‏‏ها: در اين مطالعه ژن بهينه‌شدة پروتئين نوتركيب E6، در درون وكتور داراي پروموتور T7 كلون شد. وكتور نوتركيب به سويه‌هاي اشرشياكلي BL21(DE3)، BL21(DE3)AI، Rosetta، C41(DE3) و BL21(DE3)pLysS ترانسفورم شد و توانايي اين سويه‌ها براي بيان پروتئين نوتركيب مدنظر در شرايط مختلف محيطي مقايسه شد. بيان پروتئين نوتركيب E6 در سويه‌هاي ذكرشده، در دو دماي 25 و 37 درجه سانتي‌گراد و غلظت‌هاي 0/1 و 1/0 ميلي‌مولار از IPTG و زمان‌هاي مختلف انكوباسيون بررسي شدند. نتايج: پس از انجام بهينه‌سازي بيان، شرايط بهينه براي بيان پروتئين نوتركيب E6 به دست آمد. بيشترين ميزان بيان در سويه اشرشياكلي BL21(DE3)AI و در شرايط Optical Density (OD)=0.9، غلظت 1/0 ميلي‌مولار IPTG و مدت زمان القاي 16 ساعت در دماي 25 درجه سانتي‌گراد به دست آمد. بحث و نتيجه‏گيري: نتايج به‌دست‌آمده از اين مطالعه مي‌توانند براي توليد پروتئين E6، به‌عنوان كانديد واكسن درماني در درمان سرطان‌هاي مرتبط با HPV استفاده شوند.