تثبيت كووالانسي آنزيم پراكسيداز نوتركيب لپيديوم درابا (LDP) بر روي ساختار آلي-فلزي روي با استفاده از گلوتارآلدئيد

مقدمه: پراكسيداز لپيديوم درابا (LDP) آنزيمي از كلاس III پراكسيداز‌هاي گياهي مي‌باشد كه توالي اسيدآمينه‌اي آن با پراكسيداز ترب كوهي (HRP) بيش از 90 درصد تشابه دارد.روش‌ها: در اين پژوهش، به‌منظور اتصال محكم LDP به چارچوب آلي فلزي روي (Zn MOF)، بعد از بيان و تخليص آنزيم، شرايط تثبيت با استفاده از لينكر گلوتارآلدئيد بهينه‌سازي شد و سپس ويژگي‌هاي فيزيكوشيميايي، سينتيكي و پايداري آن با آنزيم آزاد مقايسه شدند.نتايج و بحث: بهترين شرايط تثبيت با بازده‌ 67%، در غلظت‌هاي؛ Zn MOF 0.02 گرم، آنزيم mg/ml 0.75 و گلوتارآلدئيد 1.2 دسي‌مولار به مدت سه ساعت انكوبه‌شدن بدست آمد. نتايج نشان داد كه فعاليت ويژه‌ آنزيم تثبيت شده بيش از دو برابر آنزيم آزاد افزايش يافته است و Km آن به سوبستراي TMB نسبت به آنزيم آزاد، 49 درصد كاهش يافته است. همچنين پايداري سينتيكي آنزيم تثبيت شده در برابر pH و دما نسبت به آنزيم آزاد كاهش يافت