تشخيص و تعيين فراواني ليستريا مونوسيتوژنز در نمونه هاي مواد غذايي با بررسي مولكولي ژن hlyA

ﻣﻘﺪﻣﻪ: ﻟﯿﺴﺘﺮﯾﻮﻟﯿﺰﯾﻦ isteriolysin O o LLO ﯾﮏ ﻫﻤﻮﻟﯿﺰﯾﻦ ﻓﻌﺎل ﺷﺪه ﺑﺎ ﺳﻮﻟﻔﯿﺪرﯾﻞ ﻣﺘﺼﻞ ﺑﻪ ﮐﻠﺴﺘﺮول اﺳﺖ ﮐﻪ ﺗﻮﺳﻂ ژن hlyA ﻟﯿﺴﺘﺮﯾﺎ ﻣﻮﻧﻮﺳﯿﺘﻮژﻧﺰ ﮐﺪﮔﺬاري ﻣﯽ ﺷﻮد ﻫﺪف از اﯾﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﺗﺸﺨﯿﺺ و ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻓﺮاواﻧﯽ ﻟﯿﺴﺘﺮﯾﺎ ﻣﻮﻧﻮﺳﯿﺘﻮژﻧﺰ در ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎي ﻣﻮاد ﻏﺬاﯾﯽ ﺑﺎ ﺑﺮرﺳﯽ ﻣﻮﻟﮑﻮﻟﯽ ژن hlyA اﺳﺖ. ﻣﻮاد و روش ﻫﺎ: ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﺣﺎﺿﺮ ﯾﮏ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﻣﻘﻄﻌﯽ- ﺗﻮﺻﯿﻔﯽ اﺳﺖ. ﻧﻤﻮﻧﻪ ﮔﯿﺮي از اواﺳﻂ ﻣﻬﺮ ﻣﺎه 1398ﺗﺎ ﭘﺎﯾﺎن دي ﻣﺎه ﻫﻤﺎن ﺳﺎل ﺑﻪ ﻃﻮل اﻧﺠﺎﻣﯿﺪ. ﺻﺪو ﺷﺼﺪ و ﭘﻨﺞ ﻧﻤﻮﻧﻪ اﻧﻮاع ﻣﺨﺘﻠﻒ ﮔﻮﺷﺖ، ﺳﺒﺰﯾﺠﺎت، ﻫﻤﺒﺮﮔﺮ و ﻣﯿﮕﻮ ﻣﻮرد ﺑﺮرﺳﯽ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ. ﺟﻤﻊ آوري ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ﺑﻪ ﺻﻮرت ﺗﺼﺎدﻓﯽ از رﺳﺘﻮران ﻫﺎ، اﻏﺬﯾﻪ ﻓﺮوﺷﯽ ﻫﺎ، ﻣﮑﺎن ﻫﺎي ﺗﻬﯿﻪ ﻏﺬاي آﻣﺎده و ﺳﻮﭘﺮ ﻣﺎرﮐﺖ ﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ. ﮐﻠﯿﻪ ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎي ﺟﻤﻊ آوري ﺷﺪه، ﺑﺎ آزﻣﺎﯾﺸﺎت ﻓﻨﻮﺗﯿﭙﯿﮑﯽ و ﺑﯿﻮﺷﯿﻤﯿﺎﯾﯽ ﻣﻮرد ﺑﺮرﺳﯽ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ و ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎي ﻣﺸﮑﻮك ﺑﻪ ﻟﯿﺴﺘﺮﯾﺎ ﻣﻮﻧﻮﺳﯿﺘﻮژﻧﺰ ﭘﺲ از اﺳﺘﺨﺮاج DNA ﺑﺎ روش ﺟﻮﺷﺎﻧﺪن ﺑﺎ ﭘﺮاﯾﻤﺮﻫﺎي اﺣﺘﺼﺎﺻﯽ ﺑﺮاي ژن hlyA ارزﯾﺎﺑﯽ ﺷﺪ. ﯾﺎﻓﺘﻪ ﻫﺎ: ﺑﺮرﺳﯽ ﻫﺎي ﻓﻨﻮﺗﯿﭙﯿﮏ ﮐﺸﺖ ﻣﯿﮑﺮوﺑﯽ و ﺑﺮرﺳﯽ ﺑﯿﻮﺷﯿﻤﯿﺎﯾﯽ 18 ﻧﻤﻮﻧﻪ آﻟﻮده ﺑﻪ ﻟﯿﺴﺘﺮﯾﺎ ﻣﻮﻧﻮﺳﯿﺘﻮژﻧﺰ را ﺗﺎﯾﯿﺪ ﮐﺮد، از اﯾﻦ ﺗﻌﺪاد ﺑﻄﺮﯾﻖ PCR ژن hlyA 6/06 10% ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻟﯿﺴﺘﺮﯾﺎﻣﻮﻧﻮﺳﯿﺘﻮز ﻣﺜﺒﺖ ﺑﻮد. ﺷﯿﻮع آﻟﻮدﮔﯽ در ﮐﺒﺎب ﮐﻮﺑﯿﺪه 9/37 %، اﻧﻮاع ﮔﻮﺷﺖ ﻣﺮغ 4/44 %، ﻫﻤﺒﺮﮔﺮ ﻣﺤﻠﯽ 16/66 % و ﮐﺎﻫﻮ 13/33 % ﺑﻮد. اﯾﻦ ﯾﺎﻓﺘﻪ ﻫﺎ در ﻣﻘﺎﯾﺴﻪ ﺑﺎ دﯾﮕﺮ ﻣﻄﺎﻟﻌﺎت در ﺑﺮﺧﯽ ﻣﻮاد ﻏﺬاﯾﯽ ﻫﻤﺒﺮﮔﺮ ﻣﺤﻠﯽ ﺷﯿﻮع ﺑﯿﺸﺘﺮي داﺷﺖ و در ﺑﻌﻀﯽ ﻣﻮاد ﻏﺬاﯾﯽ ﮔﻮﺷﺖ ﻣﺮغ ﮐﻤﺘﺮ ﺑﻮد. ﻧﺘﯿﺠﻪ ﮔﯿﺮي: اﺳﺘﻔﺎده از روش ﺑﯿﻮﺷﯿﻤﯿﺎﯾﯽ در ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻓﺮاواﻧﯽ ﻟﯿﺴﺘﺮﯾﺎ ﻣﻮﻧﻮﺳﯿﺘﻮژﻧﺰ در ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎي ﻣﻮاد ﻏﺬاﯾﯽ در ﺷﻬﺮﺳﺘﺎن ﺳﻨﻨﺪج از درﺻﺪ ﺑﺎﻻي ﻣﺜﺒﺖ ﮐﺎذب ﺑﺮﺧﻮردار ﺑﻮد.