بيان و خالص سازي پروتئين RBD نوتركيب ويروس SARS COV-2 در سيستم بياني پروكاريوتي به منظور ارزيابي آنتي بادي IgG موجود در سرم افراد بهبوديافته از بيماري كويد 1

زمينه و هدف يكي از مهمترين پروتئينهاي ويروس 2-COV–SARS پروتئين S است كه از دو زيرواحد 1S و 2S تشكيل شده است. مهمترين ناحيه در زيرواحد S1 ناحيه اتصال به رسپتور ) RBD ( است كه نقش كليدي در اتصال به رسپتورهاي ACE راايفا ميكند. RBD يك ناحيه حفاظت شده در پروتئين S است كه هدف سيستم ايمني و توليد آنتي بادي عليه ويروس است.باتوجه به اهميت اين ناحيه )در توليد آنتي باديهاي خنثي كننده( كه ميتواند انتخاب مناسبي جهت توسعه واكسن و توليدكيت هاي تشخيص سرولوژي باشد، ازاين رو در اين مطالعه، ميزان واكنش آنتي باديهاي موجود در سرم بيماران بهبوديافته از بيماري كويد 19 با استفاده از پروتئين RBD نوتركيب توليد شده درسيستم بياني پروكاريوت به عنوان يك سيستم بياني ارزان قيمت بررسي شد.روش بررسي در اين مطالعه سازه نوتركيب RBD-b22PET به ميزبان باكتري اشرشياكلي ) 21BL ( انتقال و سلولهاي باكتري درمحيط كشت داده شد. سپس بيان پروتئين با استفاده از ايزوپروپيل بتادي تيوگالاكتوزيد ) IPTG ( القا شد. بيان پروتئين نوتركيبRBD با استفاده از ژل اكريل آميد ) SDS-PAGE ( و وسترن بلات به تأييد نهايي رسيد. درپايان پروتئين موردنظر با استفادهازستون نيكل استخراج و در يك سنجش اليزاي غيرمستقيم استفاده شد.يافته ها در مقايسه با سرم افراد سالم ) 0.412Cut off: ( افزايش معني داري در ميزان جذب نوري 30 نمونه سرمي به پروتئينRBD نوتركيب مشاهده نشد.نتيجه گيري پروتئين نوتركيب RBD توليدشده در ميزبان پروكاريوتي واكنش قابل توجهي به آنتي باديهاي موجود در سرم بيماران بهبوديافته از خود نشان نميدهد و نميتوان جهت اهداف تشخيصي از آن استفاده كرد.