بررسي اثر سيستيامين بر تكوين آزمايشگاهي اووسيت هاي گاو

Effect of Cysteamine Supplementation on in vitro Maturation of bovine Oocyte

در اين مطالعه تاثير استفاده از سيستيامين بر تكوين آزمايشگاهي اووسيت گاو مورد آزمايش قرار گرفت. تخمدان هاي گاو از كشتارگاه صنعتي تبريز جمع آوري و در محلول كلريد سديم 9/0 درصد حاوي 100 واحد بين المللي در هر ميلي ليتر پني سيلين G پتاسيم و 100 ميكروگرم در ميلي ليتر استرپتومايسين سولفات در دماي 30-35 سانتي گراد ظرف 4-2 ساعت به آزمايشگاه كشت انتقال يافتند. مجموعه اووسيت- كومولوس ها در محيط كشت TCM-199 داراي 10 درصد سرم جنيني گاو، 23/0 ميلي مولار سديم پيرووات، 25ميلي مول بيكربنات سديم، 100 واحد در ميلي ليتر پني سيلين-استرپتومايسين، 1 ميكروگرم در ميلي ليتر استراديول 17 بتا، 5/0 ميكروگرم در ميلي ليتر هورمون محرك فوليكول،100 واحد در ميلي ليتر گونادوتروپين كوريونيك انسان و سطوح صفر (گروه شاهد)، 1/،0 5/0 و 1 ميلي مولار سيستيامين به مدت 24 ساعت كشت داده شدند. ميزان بلوغ اووسيت ها در محيط داراي سطح 1/0 ميلي مول آنتي اكسيدان سيستيامين بالاتر از گروه كنترل بود (به ترتيب 66/46 در مقابل 33/33 درصد). ميزان بلوغ اووسيت-ها در محيط داراي سطح 5/0 ميلي مولار آنتي اكسيدان (55/56%) نسبت به گروه كنترل (33/33%) بالاتر بود (05/0P?). ميزان اووسيت هاي تكوين نيافته در تيمار سيستيين 1 ميلي مولار در پايين ترين حد بود (05/0?P). در كل نتايج اين تحقيق حاكي از اين بود كه استفاده از آنتي اكسيدان در محيط كشت آزمايشگاهي، مي-تواند ميزان بلوغ آزمايشگاهي اووسيت هاي گاو را بهبود دهد.

This study was aimed at determining the effect of cysteamine supplement during in vitro maturation of bovine oocytes. Cumulus-oocyte complexes (COCs) from abattoir ovaries were were obtained from local abattoir (Tabriz abattoir, East Azarbaijan, Iran) shortly after slaughter and transported to the laboratory in 0.9% NaCl solution plus 100 IU/ml potassium penicillin G, and 100 ?g/ml streptomycin sulfate at 30-35°C, within 2 to 4 h from slaughter. Cumulus-oocyte complexes (COCs) from abattoir ovaries were matured in vitro in Hepes-TCM 199 supplemented with 0.2 mM sodium pyruvate, 1 ?g/ml 17-B-estradiol, 10% fetal calf serum (FCS), 0.5 ?g/ml bFSH and 0 (control) and 0.1, 0.5 or 1 mM/ml of cysteamine for 24 h. When COCs matured in TCM 199 media with 0.1 mM/ml cysteamine, the rate of maturation were increased as compared with control group (46.66 vs 33.33%, respectively). The maturation rate of oocytes in media with 0.5 mM/ml cysteamine (56.55%) was significantly higher than control group (33.33%) (P < 0.05). Also, the percentage of unmatured oocytes in 1 mM/ml treatment group lower than other groups (P < 0.05). The results demonstrate that cysteamine when present during IVM, improved bovine oocyte maturation.