توليد آنتي بادي پلي كلونال عليه پروتئين حركتي ويروس پيچيدگي زرد برگ گوجه فرنگي و بررسي كارآيي آن در رديابي ويروس

بيماري ويروسي پيچيدگي ­زرد برگ گوجه ­فرنگي از مهم­ترين بيماري­هاي ويروسي گوجه­ فرنگي (Solanum lycopersicum L.) در مناطق گرمسيري و نيمه ­گرمسيري و گلخانه­هاي مناطق معتدل جهان به شمار مي­رود. به منظور توليد آنتي­ بادي عليه ويروس عامل بيماري براي استفاده در رديابي و معرفي كيت تشخيص بيماري، پروتئين حركتي همسانه ­سازي شده ويروس در ناقل بياني pET26(b)+، از سويه BL21(DE3) باكتري Escherichia coli بيان شد و پروتئين نوتركيب استخراج و به خرگوش تزريق شد. آنتي سرم تهيه شده، به­منظور بررسي كارآيي در رديابي پروتئين بيان شده در باكتري و تشخيص ويروس در گياهان آلوده، در آزمون هاي وسترن­بلات و الايزا مورد استفاده قرار گرفت. در آزمون وسترن­بلات و رقت 1 به 1500 آنتي­سرم، باند 13 كيلودالتوني مربوط به پروتئين حركتي ويروس را در گياهان آلوده رديابي كرد. در آزمون الايزا و رقت 1 به 1000 آنتي­ سرم، واسرشته كردن پروتئين سبب افزايش جذب نوري در نمونه­هاي گياهان آلوده شد هرچند اين اختلاف از نظر آماري معني­دار نبود. اين نتايج نشان داد كه آنتي­سرم توليد شده عليه پروتئين حركتي ويروس پيچيدگي زرد برگ گوجه­فرنگي براي آزمون وسترن­بلات مناسب بوده و جهت استفاده در آزمون الايزا نياز به تخليص آنتي­ بادي دارد.