Leptin receptor mRNA expression in Taleshi ram gonads

هورمون لپتين اساساً از بافت چربي ترشح مي‌شود و در تنظيم فعاليت توليد مثل و متابوليسم دخالت مي‌کند. حضور لپتين و گيرنده‌هاي آن در بيضه و اسپرم انسان مشخص شده است. بنابراين لپتين مي‌تواند در فيزيولوژي توليد مثل نر دخالت کند. هدف از اين تحقيق تعيين حضور mRNA گيرنده لپتين به وسيله RT-PCR در بيضه، اپيديديم و اسپرم قوچ است. اسپرم انزالي به وسيله واژن مصنوعي از ده قوچ جمع‌آوري شد. بيضه، کوتيلدون جفتي و غده آدرنال از کشتارگاه تهيه شد. کوتيلدون جفتي و غده آدرنال به عنوان کنترل مثبت مورد استفاده قرار گرفتند. اسپرم اپيديديمي از اپيديديم استخراج شد. اسپرم‌ها به وسيله روش swim-up خالص شدند. کل RNA از اسپرم انزالي، اسپرم اپيديديمي، غده آدرنال و کوتيلدون جفتي استخراج و خالص شد. mRNA مربوط به ايزوفرم بلند (Ob-Rb) و کوتاه (Ob-Ra) گيرنده لپتين در بيضه شناسايي شد. حضور mRNA گيرنده لپتين در اسپرم انزالي و اسپرم اپيديديمي به وسيله RT-PCR تاييد شد. mRNA متعلق به Ob-R و Ob-Rb در اسپرم اپيديديمي و اپيديديم مشاهد شد، ولي mRNA متعلق به Ob-Ra وجود نداشت. mRNA متعلق به Ob-Ra در اسپرم انزالي مشاهد شد ولي mRNA متعلق به Ob-Rb وجود نداشت. در نتيجه احتمالاً گيرنده لپتين در اسپرم و گنادهاي قوچ وجود دارد

Leptin is secreted mainly by fat, which is involved in energy metabolism and reproduction. Leptin and its receptor (Ob-R) have been detected in human spermatozoa and testis, thus it can be concluded leptin involves in male physiology. The goal of this study was determination of the presence of leptin receptor mRNA in the ram testis, epididymis and spermatozoa by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Ejaculated spermatozoa from ten fertile Taleshi ram were collected by means of an artificial vagina. Testes, placental cotyledons and adrenal glands were obtained from abattoir. Placental cotyledons and adrenal glands were used as the positive control. Epididymal spermatozoa recovery was performed from epididymis. To purify spermatozoa, motile sperm were isolated by the swim-up procedure. Total RNA was isolated from epididymal spermatozoa, ejaculated spermatozoa, adrenal gland and placental cotyledon and then they were purified. The mRNA for the long form (Ob-Rb) and the short form (Ob-Ra) of leptin receptor was detected in testis. RT-PCR analysis of total RNA from epididymal spermatozoa and ejaculated spermatozoa revealed the presence of leptin mRNA in these cells. The mRNA for Ob-Rb was observed in epididymis and epididymal spermatozoa, but the Ob-Ra mRNA was absent. The presence of Ob-Ra mRNA was found in ejaculated spermatozoa, whereas Ob-Rb mRNA did not exist. It can be concluded that the mRNA for leptin receptor is present in ram gonads and spermatozoa.