The effect of antioxidant supplementation in semen extenders on semen quality and lipid peroxidation of chilled bull spermatozoa

هدف از مطالعه حاضر بررسي اثرات سوپراکسيد ديسموتاز، گلوتاتيون پراکسيداز و بوتيل هيدورکسي تولوئن بر کيفيت مني پس از فرايند انجماد و ذوب بود. براي همين منظور نمونه مني از 5 گاو نر با استفاده از مهبل مصنوعي اخذ و به دنبال آن آزمايش‌هاي کيفي اوليه روي مني انجام گرديد. نمونه‌هاي مني داراي ويژگي‌هاي يکسان و کيفيت مناسب مخلوط گشته و در دو رقيق کننده حاوي سيترات زرده تخم مرغ و تريس زرده تخم مرغ رقيق شدند. در آزمايش اول سوپراکسيد ديسموتاز به مقدار 100 و 200 واحد در هر ميلي‌ليتر و گلوتاتيون پراکسيداز 50 و 100 واحد در هر ميلي‌ليتر به رقيق کننده با پايه سيترات-زرده تخم مرغ، چهار ساعت قبل از انجماد اضافه شدند. در آزمايش دوم بوتيل هيدورکسي تولوئن به مقدارهاي 5/0، 1، 2 و 4 ميلي‌مولار به رقيق کننده‌هاي با پايه‌هاي تريس و سيترات اضافه گرديد. کمترين ميزان توليد ملانو دي آلدئيد با افزودن 100 واحد سوپراکسيد ديسموتاز و 5/0 ميلي‌مولار بوتيل هيدروکسي تولوئن به رقيق کننده حاوي سيترات-زرده تخم مرغ در مقايسه با گروه کنترل به دست آمد. ميزان زنده ماندن اسپرم در نمونه‌هاي حاوي 100 واحد سوپراکسيد ديسموتاز، 5/0 و 1 ميلي‌مولار بوتيل هيدروکسي تولوئن بيشتر از ساير گروه‌هاي آزمايش در رقيق کننده با پايه سيترات بود. همچنين ميزان زنده ماندن اسپرم در نمونه حاوي 100 واحد گلوتاتيون در مقايسه با ساير گروه‌ها بالاتر بود. بيشترين درصد تحرک اسپرم با افزودن 5/0 ميلي‌مولار بوتيل هيدروکسي تولوئن به رقيق کننده با پايه تريس در مقايسه با گروه کنترل بدست آمد. نتايج يافته‌هاي ما نشان داد سوپراکسيد ديسموتاز و بوتيل هيدروکسي تولوئن وقتي به رقيق کننده با پايه سيترات اضافه مي‌شوند باعث بهبود کيفيت مني گردند. علاوه بر اين اضافه نمودن بوتيل هيدروکسي تولوئن به رقيق کننده حاوي تريس-زرده تخم مرغ تا حدي باعث بهبود تحرک اسپرم مي‌گردد.

The aim of this study was to determine the effects of the antioxidants superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx) and butylated hydroxytoluene (BHT) on microscopic semen parameters and lipid peroxidation following the freeze-thawing of bull semen. Ejaculates were collected from five Holstein bulls and pooled at 37 C. The semen samples were diluted with a CEY extender containing additives including 100 U and 200 U SOD/ml, 50 U or 100 U GPx/ml and an extender containing no antioxidants (control) and stored in liquid nitrogen. The pooled ejaculates were then diluted with CEY or a Tris (hydroxymethyl) aminomethane (TRIS)-based extender (TEY) alone or with added 0.5, 1.0, 2.0 or 4.0 mM BHT, and the routine semen evaluation was conducted. The lowest production of malondialdehyde (MDA) was obtained by addition of 100 U SOD/ml, 0.5 and 1 mM BHT to CEY extender compared with the other groups. Sperm viability and motility was significantly higher when 0.5, 1 mM BHT and 100 U SOD/ml were added in CEY extender. The highest sperm viability was achieved by addition of 50 U GPx/ml to CEY extender. In addition, sperm motility was significantly higher in samples extended in Tris-egg yolk (TEY) with 0.5 mM BHT compared with the control group. The results suggest that CEY extender can be improved with the addition of SOD and BHT.