Molecular detection and identification of Anaplasma species in sheep from Ahvaz, Iran

آناپلاسموز گوسفندي يک بيماري ريکتزيايي با ناقل کنه‌اي مي‌باشد که در مناطق گرمسيري و نيمه گرمسيري شايع است. در مطالعه حاضر، روش PCR-RFLP بر اساس ژن پروتئين سطحي اصلي 4 (MSP4) جهت رديابي آلودگي به آناپلاسما در نمونه‌هاي خون اخذ شده از 119 گوسفند نواحي مختلف اهواز واقع در جنوب غربي ايران و اطراف آن مورد استفاده قرار گرفت. ميزان آلودگي آناپلاسمايي يافت شده در نمونه‌ها به روش PCR، 4/87% (119/104) بود. در مقابل با روش معمول بررسي ميکروسکوپي گسترش‌هاي خوني، اجرام آناپلاسمايي تنها در 6/33% (119/40) از نمونه‌ها مشاهده شد. ارزيابي RFLP نشان داد که تمامي نمونه‌هاي PCR مثبت، از گونه آناپلاسما اوويس بودند. همچنين آلودگي همزمان با آناپلاسما مارژيناله براي اولين بار در ايران در 50% (104/52) نمونه‌هاي آلوده به آناپلاسما ديده شد. اين يافته‌ها بيانگر حساسيت بالاتر PCR نسبت به روش‌هاي متداول ميکروسکوپي در تشخيص آناپلاسموز به ويژه در دام‌هاي حامل مي‌باشد. همچنين مطالعه حاضر نشان داد آناپلاسموز گوسفند ناشي از آناپلاسما اويس و آناپلاسما مارژيناله در منطقه اهواز موجود بوده و از شيوع بالايي برخوردار است. اين اولين گزارش در نوع خود در اين ناحيه است.

Ovine anaplasmosis is a tick-borne rickettsial disease, widespread in tropical and subtropical areas. In the present study, a PCR-RFLP method based on major surface protein 4 (MSP4) gene, was utilized for the detection of Anaplasma infection in 119 sheep blood samples collected from different parts of Ahvaz in the southwest of Iran. PCR identified Anaplasma infections in 87.4% (104/119) of the samples in contrast to the routine blood smear examination, which revealed inclusion bodies in only 33.6% (40/119) of samples. RFLP assessment revealed that all PCR positive samples were A. ovis, while for the first time in Iran, a mixed infection with A. marginale was seen in 50% (52/104) of Anaplasma infected samples. These results suggest higher sensitivity of PCR method over the conventional microscopic technique for diagnosis of anaplasmosis, particularly in carrier animals. It also revealed that ovine anaplasmosis caused by A. ovis and A. marginale is present and highly prevalent in Ahvaz and appears to be the first report from this region.