Title of article :
Agrobacterium-mediated transformation of cotyledonary leaf of lettuce (Lactuca sativa L.) by the GCHI gene
Author/Authors :
فلاح زياراني، معصومه نويسنده Department of Agricultural Biotechnology, Imam Khomeini International University, Postal Code: 3414916118, Qazvin, Iran. Fallah-Ziarani, Masumeh , حداد، رحيم نويسنده hadad, rahim , گروسي، قاسمعلي نويسنده عضو هيات علمي گروه بيوتكنولوژي كشاورزي، دانشكده فني و مهندسي، دانشگاه بين المللي امام خميني (ره) قزوين , , جلالي، مختار نويسنده Department of Plant Molecular Biology, Tarbiat Modarres University, P. O. Box: 14115-111, Tehran, Iran. Jalali, Mokhtar
Issue Information :
دوفصلنامه با شماره پیاپی 0 سال 2013
Abstract :
كاهو (Lactuca sativa) متعلق به خانواده ي asteraceae بوده و در سطح وسيع به عنوان يكي از سبزيجات برگي استفاده مي شود. برگ هاي كوتيلدوني حاصل از جوانه كاهوي رشد كرده در شرايط آزمايشگاهي، به وسيله ي پلاسميد حامل ژن GCHI تراريخت شدند. تاثير تعداد روزهاي استقرار و همكشتي ريزنمونه‌ها در فراواني گياهان تراريخت مورد بررسي قرار گرفت. بعد از همكشتي، ريزنمونه‌ها به محيط باززايي محتوي 200 ميلي‌گرم در ليتر سفترياكسون و 20 ميلي‌گرم در ليتر كانامايسين منتقل گرديدند. بهترين محيط كالوس‌زايي محيط MS محتوي 05/0 ميلي‌گرم در ليتر NAA و 2/0 ميلي‌گرم در ليتر BAP بود. بعد از انتقال كالوس‌ها به محيط MS محتوي 05/0 ميلي‌گرم در ليتر NAA و 4/0 ميلي‌گرم در ليتر BAP نوساقه‌ها پديدار شدند. سرانجام نوساقه‌هاي تراريخت در محيط MS فاقد تنظيم‌كننده‌هاي رشد ريشه‌دار گرديدند. حضور ژن GCHI در گياهان نسل‌هاي T0 و T1 توسط تجزيه PCR با استفاده از DNA ژنومي مورد مطالعه قرار گرفت و نتايج نشان داد كه در نسل T0 از بين 52 گياه بدست آمده، فقط 10 گياه حامل ژن GCHI مي‌باشند. ميزان فراواني نوتركيبي در اين تحقيق 19% بود.
Abstract :
Lactuca sativa is widely used as a leafy vegetable belonging to the Asteraceae family. Cotyledonary leaves of in vitro lettuce seedlings were transformed by plasmids containing the GCHI gene. Also the effects of number of days of pre-cultivation and co-cultivation of explants were examined on the transformation frequency. After co-cultivation, the explants were transferred onto the regeneration medium containing 200 mg/l ceftriaxone and 20 mg/l kanamycin. The best callogenesis was obtained in the MS medium containing 0.05 mg/l NAA and 0.4 mg/l BAP. Shoot regeneration was achieved after transferring the calli onto the MS medium containing 0.05 mg/l NAA and 0.4 mg/l BAP. Finally, the shoots were rooted on the MS medium without growth regulators. A PCR analysis of the genomic DNA confirmed the presence of GCHI genes in both T0 and T1 plants. PCR analysis of T0 plants revealed that 10 out of 52 plants were positive for the GCHI gene. The transformation frequency was 19%.
Journal title :
Iranian Journal of Genetics and Plant Breeding
Journal title :
Iranian Journal of Genetics and Plant Breeding
