Identification of Avian Salmonella Isolates by PCR-RFLP Analysis of a fliC Gene Fragment

جنس سالمونلا پلي مورفيك و شامل تعداد زيادي سروتيپ است كه از نظر ژنتيكي به هم نزديك مي باشند. اين باكتري يكي از بيماريزا هاي نوظهور در بيماري هاي منتقله از طريق غذا است كه غالبا در تخم مرغ يافت ميشود. سالمونلا انتريكا يكي از پاتوژن هاي بالقوه در بهداشت عمومي در سراسر جهان ميباشد. 31 نمونه سالمونلاي جدا شده توسط آنتي سرم هاي اختصاصي مورد آزمايش قرار گرفتند كه نتايج آن شامل سالمونلا انتريتيديس (6/51?)، سالمونلا تيفي موريوم (8/25%)، سالمونلا اينفنتيس (4/19%) و سالمونلا كوليندال (2/3%) بود.DNA به روش فنل-كلروفرم-ايزوآميل الكل استخراج گرديد. تمام جدايه ها باند bp1500 را با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي ژن fliC را نشان دادند. محصول PCR توسط آنزيم محدود الاثر HhaI مورد هضم قرار گرفت. نتايجPCR-RFLP سه الگو را در بين تمام جدايه ها نشان داد. نتايجPCR-RFLP 3 الگو را در ميان تمام نمونه ها نشان داد. نتايج بدست آمده در اين مطالعه نشان داد كه استفاده از آنزيم محدودالاثر HhaI قادر به تفكيك سالمونلا انتريتيديس و سالمونلا كوليندال مي باشد و شباهتي در الگوي بدست آمده در سالمونلا تيفي موريوم و سالمونلا اينفنتيس وجود دارد.

The genus of Salmonella is very polymorphic and comprised of a number of genetically closely related serotypes. It is one of the emerging pathogen in food-borne disease which is often found in contaminated chicken eggs. Salmonella enterica is considered one of the major pathogens in public health worldwide. A total of 31 Salmonella isolates identified by specific antisera, which included Salmonella enteritidis (51.6%), Salmonella typhimurium (25.8%), Salmonella infantis (19.4%) and Salmonella colindale (3.2%). DNA was extracted using phenol- chloroform- isoamylalchol method. All the isolates showed fliC gene (1500bp) by using specific primers. PCR products were subjected to digestion using HhaI restriction endonuclease. PCR- RFLP results showed 3 patterns between all isolates. Our research gained in this study demonstrated that using HhaI restriction endonuclease could differentiate Salmonella enteritidis and Salmonella colindale but there is similarity between pattern of Salmonella typhimurium and Salmonella infantis.