Evaluation of antibody against hydatid fluid, protoscolex and adult worms of Echinococcus granulosus antigens by ELISA in mice

هیداتیدوز یکی ازبیماریهای مشترک بین انسان و دام با انتشار جهانی است و بوسیله مرحله لاروی انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس ایجاد مشود. در مطالعه حاضر، 20 موش به چهار گروه 5 تایی تقسیم شدند ( سه گروه آزمایش و یک گروه کنترل). هر موش در گروههای آزمایشی 1 ، 2 و 3 بوسیله 100 میکروگرم (100 میکرو لیتر) آنتی ژنهای مایع کیست هیداتید، ‌پروتواسکولکس و انگل بالغ اکینوکوکوس گرانولوزوس مورد تزریق قرار گرفتند. به هر موش 200 میکرولیتر ( 100 میکروگرم از آنتی ژنهای فوق در 100 میلی لیتر فسفات بافر حل شده و با 100 میکرو لیتر ادجوانت کامل فروند مخلوط شدند ) به روش زیر جلدی تزریق گردید. موشهای گروه کنترل نیز با دوز یکسان (100 میکرو لیتر فسفات بافر و 100 میکرو لیتر ادجوانت فوق ) مورد تزریق قرار گرفتند. تزریق مجدد 4 هفته بعد با مقدار فوق و با استفاده از ادجوانت ناقص فروند انجام شد. سه هفته بعد، هر موش با 2000 عدد پروتواسکولکس به روش داخل صفاقی تلقیح شدند. خونگیری از موشها قبل و پس از تزریقات انجام شد و میزان آنتی بادی بوسیله آزمایش الایزا مورد بررسی قرار گرفت. سطح تولید آنتی بادی در 28 روز پس از تزریق در موشهایی که با انگل بالغ ایمن شده بودند 7 برابر بیشتر قبل از ایمن کردن آنها بود و نیز تولید آنتی بادی در این گروه بیشتر از موشهای ایمن شده با مایع کیست هیداتید و پروتواسکولکس بود. سطح تولید آنتی بادی در روز 49 (سه هفته پس از دومین ایمن سازی) در گروه آزمایشی که با آنتی ژن انگل بالغ اکینوکوکوس گرانولوزوس مورد تزریق قرار گرفته بودند بیشتر از دو گروه دیگر بود. نتایج حاصله از این آزمایش دلالت بر این دارد که آنتی ژن انگل بالغ اکینوکوکوس گرانولوزوس میتواند به عنوان یک کاندیدا برای تولید واکسن مورد استفاده قرار گیرد.

Echinococcosis is one of the world’s relevant zoonoses, affecting both humans and their domestic animals and caused by infection with the metacestode stage of the dog tapeworm, Echinococcus granulosus. In the present study, twenty mice were randomly divided into 4 groups of 5. Each mouse in groups 1, 2 and 3 was immunized with 100 μg of hydatid cyst fluid protein, protoscolex and adult worms of E. granulosus proteins in 100 μl of phosphate-buffered saline which was emulsified with an equal volume of Freund’s complete adjuvant respectively. In group 4, mice were just immunized with above adjuvant in PBS. Mice were boosted four weeks after the first immunization with the same preparation and with Freund’s incomplete adjuvant. Three weeks later, each mouse was challenged with 2000 protoscolices intraperitoneally. Sera were collected before and after each immunization and serum antibodies were tested by ELISA. Results showed that the level of antibody in mice which were immunized with adult worms of E. granulosus on day 28 was roughly seven times higher than before immunization and was higher than hydatid cyst fluid and protoscolex. Level of antibody in mice immunized with adult worms of E. granulosus was also higher than in hydatid cyst fluid and protoscolex groups at day 49. The results of this article indicate that antigen of adult worms of E. granulosus can be used as a candidate for production of a vaccine.