First molecular detection of Chronic Bee Paralysis Virus (CBPV) in Iran

در ميان ويروس هاي آلوده كننده زنبور عسل، ويروس فلجي مزمن (CBPV) به عنوان عامل بوجود آورنده زيان هاي قابل توجه در كلني هاي زنبور عسل شناخته شده است. ويروس فلجي مزمن يك RNA ويروس تك رشته اي، پلي مورف و طبقه بندي نشده مي باشد. با استفاده از تكنيك RT-PCR، عفونت با اين ويروس در زنبور عسل را مي توان به شيوه اي سريع و دقيق شناسايي كرد. در اين مطالعه از زنبورهاي بالغ كلني هاي مبتلا، با علايم كاهش جمعيت، ريزش ناگهاني، فلجي، و آلودگي با وآروآ يا كلني هايي كه داراي سابقه چنين علايمي بوده اند، استفاده شده است. نمونه ها از زنبورستانهاي واقع در 23 استان ايران در فاصله ماه هاي جولاي تا سپتامبر 2011 و 2012 جمع آوري گرديد. مجموعاً از 160 زنبورداري نمونه جمع آوري و با رعايت زنجيره سرد براي غربالگري ويروس به آزمايشگاه مولكولار بايولوژي بخش زنبور عسل موسسه رازي انتقال يافت. از هر زنبورداري 500-100 زنبور كارگر بالغ نمونه برداري شد. استخراج RNA و RT-PCR با كيت هاي QIAGEN انجام گرديد. پرايمرها يك قطعه bp315 را تكثير مي دادند. محصولات روش واكنش زنجيره اي پليمراز روي ژل آگارز 2/1 ? (رنگ آميزي شده با اتيديوم برومايد) الكتروفورز شدند. به دنبال واكنش RT-PCR با پرايمرهاي اختصاصي، از RNA هاي استخراج شده، 12 نمونه (5/7?) با CBPV مثبت تشخيص داده شدند. در اين مطالعه براي اولين بار ويروس فلجي مزمن زنبور عسل (CBPV) با روش مولكولي از تعدادي از زنبورستانهاي مناطق مختلف ايران جداسازي و شناسايي گرديد. لازم است مطالعات بيشتري در زمينه ميزان پراكنش ويروس در زنبورستانهاي مناطق مختلف ايران بر اساس شرايط جغرافيايي و آب و هوايي، نحوه پرورش و مديريت بهداشت كلني ها صورت پذيرد.

Among the viruses infecting honey bees, chronic bee paralysis virus (CBPV) is known to induce significant losses in honey bee colonies. CBPV is an unclassified polymorphic single stranded RNA virus. Using RT-PCR, the virus infections in honey bees can be detected in a rapid and accurate manner. Bee samples were collected from 23 provinces of Iran, between July-September 2011 and 2012. A total of 160 apiaries were sampled and submitted for virus screening. RNA extraction and RT-PCR were performed with QIAGEN kits. The primers lead to a fragment of 315 bp. The PCR products were electrophoresed in a 1.2 % agarose gel. Following the RT-PCR reaction with the specific primers, out of the 160 apiaries examined, 12 (7.5 %) were infected with CBPV. This is the first study of CBPV detection in Iranian apiaries. We identified CBPV in the collected samples from different geographic regions of Iran.