Title of article :
Dual Promoter Vector Construction for Simultaneous Gene Expression Using Spliced Overlap Extension by Polymerase Chain Reaction (SOE-PCR) Technique
Author/Authors :
سخاوتي، م.ه. نويسنده Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran Sekhavati, M.H. , طهمورث?پور، م. نويسنده Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran Tahmoorespur, M. , عباسي-دلوئي، ط. نويسنده Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran Abbassi-Daloii, T. , يوسفي، س. نويسنده Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran Yousefi, S. , خبيري، ع.ا. نويسنده Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran Khabiri, A.A. , اکبري، ر. نويسنده Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran Akbari, R. , شکاري، ع نويسنده Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran Shekari, E.
Issue Information :
فصلنامه با شماره پیاپی 0 سال 2015
Pages :
6
From page :
853
To page :
858
Abstract :
سه سیستم مختلف شامل بی­سیسترونیک، dual-vector و وکتور با دو پروموتور برای بیان همزمان دو پروتئین مختلف و همچنین بررسی اثر متقابل آنها وجود دارد. سیستم­های بی­سیسترونیک و dual-vector در مقایسه با سیستم وکتور با دو پروموتور معایبی دارند. در این مقاله روش ساده­ای بر اساس تکنیک SOE-PCR برای ساخت یک وکتور با دو پروموتور توضیح داده شده است. این وکتور می­تواند برای بیان همزمان پروتئین­های Omp25 و Omp31 به عنوان دو آنتی ­ژن عمده بروسلا ملیتنسیس، استفاده شود. برای ساخت وکتور با دو پروموتور، دو جفت مگا-پرایمر دارای توالی جایگاه­های محدودالاثر آنزیمی، پروموتور T7، اپران لک و جایگاه اتصال ریبوزوم (RBS)، در SOE-PCR مورد استفاده قرار گرفتند. وکتور ساخته شده در این مطالعه می­تواند برای بیان همزمان ژن­های دیگر در میزبان­های بیانی باکتریایی گوناگونی استفاده گردد
Abstract :
There are two different co-expression systems including bicistronic; dual-vector or two-promoter to express two different genes simultaneously and also to study protein-protein interactions. Bicistronic system has disadvantages e.g. compared with two-promoter system. In this paper, a simple method based on spliced overlap extension by polymerase chain reaction (SOE-PCR) technique was demonstrated for construction of two-promoter vector to express two genes equally. To construct two-promoter vector, two pairs of mega-primer containing enzymatic restriction sites, T7 promoter, Lac operator and ribosome binding site (RBS) sequences were used in SOE-PCR. The constructed vector can be used in order to co-expression of other genes properly in a variety of bacterial expression hosts. 
Journal title :
Iranian Journal of Applied Animal Science
Journal title :
Iranian Journal of Applied Animal Science
Record number :
2388104
Link To Document :
بازگشت