آناليز انسجام كروماتين و آسيب DNA اسپرماتوزوآي بوفالو

اين مطالعه به منظور تخمين انسجام كروماتين و آسيب DNA به وسيله الكتروفورز DNA و سنجش كامت در مايع مني تازه و منجمد بوفالو انجام گرفت. نمونه‌هاي مايع مني از چهار بوفالوي نر جمع‌آوري شدند، و مايع مني بعد از فريز از لحاظ تحرك اسپرم، زنده ماني، ناهنجاري‌هاي اسپرم، انسجام كروماتين و آسيب DNA بررسي شد. اختلاف معني‌داري در پارامترهاي مايع مني در ميان گاوهاي نر بعد از آب شدن پيدا شد. اختلاف‌هاي بسيار معني‌داري (P<0.001) در انسجام كروماتين بين مايع مني تازه و منجمد مشاهده شدند. اختلاف معني‌داري بين گاوها از نظر انسجام كروماتين در مايع مني تازه وجود نداشت، اما در مايع مني منجمد در ميان گاوها اختلاف معني‌داري شناسايي شد (P<0.05). قطعه قطعه شدن DNA به وسيله الكتروفورز ژل آگاروز ديده نشد. درصد اسپرم با DNA آسيب ديده با سنجش كامت به طور معني‌داري بين مايع مني تازه و منجمد فرق مي‌كرد. رابطه منفي معني‌داري بين تحرك و آسيب به DNA (r= 0.68, P<0.05) وجود داشت و ناهنجاري‌هاي اسپرم و قطعه قطعه شدن DNA به طور قابل توجهي به شكل مثبت در ارتباط بودند (r=0.59, P<0.05). در نتيجه، ارزيابي آسيب DNA ممكن است اطمينان از نرمال بودن ژنوم را ميسر ساخته و بتواند تكامل روش‌هاي اصلاح شده انتخاب اسپرماتوزوآ با DNA سالم را به منظور استفاده در تلقيح مصنوعي هدايت نمايد.

This study was conducted to determine chromatin integrity and DNA damage by DNA electrophoresis and comet assays of buffalo fresh and frozen semen. Semen sles were collected from four buffalo bulls and evaluated after freezing for semen motility, viability, sperm abnormalities, chromatin integrity and DNA damage. A significant variation was found in semen parameters after thawing. Highly significant differences (P<0.001) in chromatin integrity were observed between fresh and frozen semen. For the fresh semen, there was no significant difference between the bulls for chromatin integrity however, a significant variation (P<0.05) was detected in their frozen semen. No DNA fragmentation was observed by agarose gel electrophoresis. The percentage of sperm with damaged DNA detected by comet assay differed significantly between fresh and frozen semen. A significant negative correlation was recorded between motility and DNA damage (r= 0.68, P<0.05). Sperm abnormalities and DNA fragmentation were significantly positively correlated (r=0.59, P<0.05). In conclusion, DNA damage evaluation can provide reassurance about genomic normalcy and guide the development of improved methods of selecting spermatozoa with intact DNA tobe used in artificial insemination.