Author/Authors :
Ghoddusi، A. نويسنده Faculty of Veterinary Medicine,Department of Microbiology,University of Tehran,Tehran,Iran قدوسي, عارفه , Nayeri Fasaei، B. نويسنده Faculty of Veterinary Medicine,Department of Microbiology,University of Tehran,Tehran,Iran نيري فسايي, بهار , Karimi، V. نويسنده Faculty of Veterinary Medicine,Department of Clinical Sciences,University of Tehran,Tehran,Iran كريمي, وحيد , Ashrafi Tamai، I. نويسنده Faculty of Veterinary Medicine,Department of Microbiology,Bu-Ali Sina University,Hamedan,Iran اشرافي تماي, ايرج , Moulana، Z. نويسنده Faculty of Paramedical Science,Department of Laboratory and Environment Health,Babol University of Medical Sciences,Babol,Iran مولانا, زهرا , Zahraei Salehi، T. نويسنده Faculty of Veterinary Medicine,Department of Microbiology,University of Tehran,Tehran,Iran زهرايي صالحي, تقي
Abstract :
هدف از اين مطالعه شناسايي مولكولي سالمونلا اينفنتيس جدا شده از طيور بومي و تعيين ژن‌هاي مقاومت آنتي بيوتيكي آن‌ها به روش واكنش زنجيره‌اي پليمراز مي‌باشد. در اين مطالعه 46 نمونه سالمونلا كه از طيور بومي استان مازندران جدا گرديده بود، مورد مطالعه قرار گرفت. ابتدا آزمايش سروتايپينگ نمونه‌ها با استفاده از آنتي سرم‌هاي O و H صورت گرفت. سپس سرووار سالمونلاهاي سروتايپ شده با روش واكنش زنجيره‌اي پليمراز تاييد شد. روش استاندارد ديسك ديفوزيون براي تعيين حساسيت جدايه‌ها نسبت به 13 عامل ضد ميكروبي انجام گرديد. از مجموع 46 نمونه جمع‌آوري شده، با استفاده از روش سروتايپينگ 44 نمونه به عنوان سالمونلا تاييد شدند. تمامي 44 جدايه سالمونلا در اين روش، به گروه سرمي C1 و سرووار اينفنتيس تعلق داشتند. سرووار اين جدايه‌ها، با روش واكنش زنجيره‌اي پليمراز، به عنوان سرووار اينفنتيس تاييد شدند. در اين آزمون تمامي نمونه‌ها به آنتي بيوتيك‌هاي تتراسايكلين و داكسي سايكلين و بيش از 70% نمونه‌ها به آنتي بيوتيك‌هاي كلرامفنيكل و فلورفنيكل مقاومت نشان دادند. آزمون واكنش زنجيره‌اي پليمراز جهت تعيين ژن‌هاي مقاومت، انجام گرديد. در اين مطالعه از ژن‌هاي floR، catI جهت تعيين ژن‌هاي مقاومت به فلورفنيكل و كلرامفنيكل و از ژن‌هاي tetA و tetG جهت تعيين ژن مقاومت به تتراسايكلين استفاده شد. تمامي نمونه‌هاي مقاوم به فلورفنيكل و كلرامفنيكل، داراي ژن‌هاي floR و cat بودند. هيچكدام از نمونه‌هاي مقاوم به تتراسايكلين داراي ژن tetA يا tetG نبودند. واكنش زنجيره‌اي پليمراز از پرگنه و كشت در محيط آنتي بيوتيك‌دار به طور همزمان انجام گرديد و تمامي نمونه‌هاي داراي ژن مقاومت روي محيط‌هاي آنتي بيوتيك‌دار قادر به رشد بودند.
Abstract :
This study aims at molecular identification of Salmonella Infantis isolated from backyard chickens and the detection of their antibiotic resistance genes. A total of 46 Salmonella suspected sles isolated from backyard chickens of northern Iran were collected. Serotyping was done by the traditional method and then confirmed by PCR. Antimicrobial susceptibility of the isolates against 13 antimicrobial agents was determined by the standard disk diffusion method. There were 44 sles identified as Salmonella. Serotyping results showed that all 44 isolates belonged to serogroup C1 and serovar Infantis. The most resistance observed was to tetracycline and doxycycline (100%), chlorhenicol (79%) and florfenicol (72%). The floR, catI, tetA and tetG genes were used for the detection of florfenicol chlorhenicol and tetracycline resistance. In order to identify the phenotypic resistance in strains which showed resistance genes by PCR, colony PCR and culture on plates each containing antibiotic was performed simultaneously. All the Salmonella Infantis resistant to florfenicol and chlorhenicol harbored floR and catI. None of the Salmonella resistant to tetracycline carried tetA or tetG. The result of colony PCR and culture in antibiotic medium confirmed theresults of PCR and indicated phenotypic resistance in these sles.
