Other language title
Development of OMP based indirect ELISA to gauge the antibody titers in bovines against Pasteurella multocida
Title of article
تكامل ELISA غير مستقيم بر پايه OMP براي اندازهگيري تيترهاي آنتي بادي پاستورلا مولتوسيدا در گاوها
Author/Authors
Dogra، V. نويسنده Dr. G. C. Negi College of Veterinary & Animal Sciences,Department of Veterinary Microbiology,CSK Himachal Pradesh Agricultural University,Himachal Pradesh,India دگرا, ويشال , Verma، S. نويسنده Dr. G. C. Negi College of Veterinary & Animal Sciences,Department of Veterinary Microbiology,CSK Himachal Pradesh Agricultural University,Himachal Pradesh,India ورما, صوبهاش , Singh، G. نويسنده Dr. G. C. Negi College of Veterinary & Animal Sciences,Department of Veterinary Physiology & Biochemistry,CSK Himachal Pradesh Agricultural University,Himachal Pradesh,India سينگ, گيتانجلي , Wani، A. H. نويسنده Dr. G. C. Negi College of Veterinary & Animal Sciences,Department of Veterinary Microbiology,CSK Himachal Pradesh Agricultural University,Himachal Pradesh,India واني, عسيم حبيب , Chahota، R. نويسنده Dr. G. C. Negi College of Veterinary & Animal Sciences,Department of Veterinary Microbiology,CSK Himachal Pradesh Agricultural University,Himachal Pradesh,India چاهتا, راجش , Dhar، P. نويسنده Dr. G. C. Negi College of Veterinary & Animal Sciences,Department of Veterinary Microbiology,CSK Himachal Pradesh Agricultural University,Himachal Pradesh,India دار, پراسِنجيت , Verma، L. نويسنده Dr. G. C. Negi College of Veterinary & Animal Sciences,Department of Veterinary Microbiology,CSK Himachal Pradesh Agricultural University,Himachal Pradesh,India ورما, لُويت , Sharma، M. نويسنده Dr. G. C. Negi College of Veterinary & Animal Sciences,Department of Veterinary Microbiology,CSK Himachal Pradesh Agricultural University,Himachal Pradesh,India شارما, مَنديپ
Issue Information
فصلنامه با شماره پیاپی 53 سال 2015
Pages
7
From page
350
To page
356
Abstract
پاستورلا مولتوسيدا (Pasteurella multocida)، يك پاتوژن مهم حيوانات اهلي مختلف ميباشد. پروتئينهاي غشاي خارجي (OMPs) نقش عمدهاي در پاتوژنز و ايمنيزايي پاستورلا مولتوسيدا ايفا ميكنند. هدف اين مطالعه تكامل روش سنجش ايمونوسوربنت متصل به آنزيم (ELISA) بر پايه OMPs جهت تعيين تيترهاي آنتي بادي در حيوانات پس از عفونت يا جهت اندازهگيري قدرت واكسن بود. OMPs از پاستورلا مولتوسيدا P:52 (سويه واكسن) و پاستورلا مولتوسيدا B:2 جدا شده از وقوع طبيعي سپتي سمي هموراژيك (HS) استخراج و خالص سازي شدند و روي SDS PAGE و از طريق western blot آناليز شدند. پروفايل OMPs سويه واكسن و جدايه گرفته شده از وقوع طبيعي HS مشابه يكديگر بودند. بهينه سازي تركيبات مختلف مانند آنتي ژنهاي كوتينگ، كنژوگه ضد گونه و غيره عليه سرم هايپر ايميون و پري ايميون آنتيپاستورلا مولتوسيدا انجام شد. اعتبارسنجي روش ELISA غير مستقيم بر پايه OMP جهت اندازهگيري پاسخ ايمني در برابر پاستورلا مولتوسيدا در گاو، حساسيت تشخيصي (DSN) 91% و ويژگي تشخيصي (DSP) تقريبا 100% در نقطه برش 25% را تأييد نمود. ELISA غير مستقيم بر پايه OMP در مقايسه با روش بر پايه WCL اختصاصيتر بوده، اما داراي حساسيت كمتري بود.
Abstract
Pasteurella multocida (P. multocida) is an important pathogen of various domestic animals. The outer membrane proteins (OMPs) play a major role in pathogenesis and immunogenicity of P. multocida. The aim of the study was to develop indirect enzyme linked immuno sorbant assay (ELISA) based on OMPs to ascertain the antibody titers in animals postinfection or to gauge the potency of vaccine. The OMPs were extracted and purified from P. multocida P:52 (vaccine strain) and P. multocida B:2 isolated from natural outbreak of Haemorrhagic septicaemia (HS) and analyzed on SDS PAGE and through western blot. The OMPs profile of the vaccine strain and the isolate from the natural outbreak of HS were found to be similar. Optimization of various components viz. coating antigens, antispecies conjugate, etc. were carried out against both antiP. multocida hyper immune and pre immune serum. Validation of OMP based indirect ELISA assay to measure immune response against P. multocida in bovine revealed 91% diagnostic sensitivity (DSN) and about 100% diagnostic specificity (DSP) at 25% cut off. OMP based indirect ELISA was found to be more specific, but less sensitive as compared to WCL based assay.
Keywords
Pasteurella multocida , Indirect ELISA , Outer membrane proteins , Diagnostic specificity , Diagnostic sensitivity
Journal title
Iranian Journal of Veterinary Research (IJVR)
Journal title
Iranian Journal of Veterinary Research (IJVR)
Record number
2398337
Link To Document