بررسي ويژگي‌هاي فنوتيپي و ريبوتايپينگ به روش PCR جدايه‌هاي سودوموناس فلورسنس در طي رديابي راه‌هاي ايجاد آلودگي در خط توليد شير پاستوريزه

راه‌هاي ايجاد آلودگي با باكتري سودوموناس فلورسنس در خط توليد شير پاستوريزه در يك كارخانه بزرگ لبنيات در جنوب ايران مورد بررسي قرار گرفت. نمونه‌هاي شير خام و پاستوريزه از شش نقطه در طول خط توليد اخذ شد و تمام نمونه‌ها تا رسيدن شمارش باكتري‌هاي هوازي به CFU mL 1 107 106 در دماي C 7 نگهداري شد. براي تشخيص باكتري كلني‌ها به صورت تصادفي از روي محيط كشت انتخاب گرديد. در نمونه‌هاي شيرِ بلافاصله پس از دستگاه پاستوريزه كننده هيچ گونه باكتري گرم منفي سرماگرايي جدا نگرديد. آلودگي با اين باكتري‌ها اغلب در مرحله پر كردن بسته‌هاي شير رخ داد. از 1/34% بسته‌هاي شير پاستوريزه باكتري‌هاي گرم منفي سرماگرا و از 9/4% آن‌ها سودوموناس فلورسنس جدا گرديد. بيست و سه جدايه‌هاي سودوموناس فلورسنس از نظر ويژگي‌هاي فنوتيپي و 16S 23S PCR ribotyping مورد بررسي قرار گرفتند و تحليل فيلوژنتيكي بر اساس ويژگي‌هاي فنوتيپي و ژنوتيپي انجام شد. اين جدايه‌ها در شش بيوتايپ (B1 B6) قرار گرفتند. در اغلب موارد يك ريبوتايپ مشخص براي هر بيوتايپ يافت شد، هر چند براي هر كدام از بيوتايپ‌هاي B2 و B6 دو ريبوتايپ مشخص گرديد. روش 16S 23S PCR ribotyping امكان تفكيك جدايه‌ها را فراهم آورد و بر اين اساس جدايه‌ها در 5 ريبو تايپ قرار گرفتند.

Contamination sites of Pseudomonas fluorescens were traced in the production line for milk pasteurization in a large dairy plant in Shiraz, Iran. Sles of raw and pasteurized milk were collected at six sites along the line. All milk sles were incubated at 7°C until the aerobic plate count had reached 10^6 10^7 cfu mL^ 1. Colonies were picked randomly and identified. No growth of gram negative psychrotrophic bacteria (GNP) was detected in the immediately pasteurized milk sles (just after the pasteurization), during long incubation at 7°C. Recontamination most often occurred in the filling step. In this study 34.1 and 4.9% of the milk packages showed contamination with GNP and P. fluorescens, respectively. Twenty three P. fluorescens isolates were examined for phenotypic characteristics and 16S 23S PCR ribotyping. Phylogenetic analysis was conducted on the phenotypic and genotypic characteristics. The P. fluorescens isolates were shown to belong to 6 biotypes (B1 B6). The predominance of a particular ribotype was often observed for a given biotype, although there were two ribotypes in each of the B2 and B6 biotypes. The 16S 23S PCR ribotyping technique allowed differentiation between the isolates. Based on this method, the isolates belonged to 5 subtypes. Phylogenetic analysis based on 16S 23S PCR ribotyping and phenotypic characterization could be helpful in tracking contamination routes in the production line for milk pasteurization.