توانايي تكامل اووسيت‌هاي شتر يك كوهانه درومداري بارور شده در محيط آزمايشگاهي به وسيله اسپرم‌هاي اپيديديم و انزال شده منجمدذوب شده

هدف از مطالعه حاضر مقايسه قابليت بارورسازي اسپرم‌هاي اپيديديم و انزال شده منجمدذوب شده به منظور استاندارد سازي پروتكل آماده سازي مايع مني براي IVF بود. نمونه‌هاي مايع مني به وسيله واژن مصنوعي از 7 شتر درومداري جمع‌آوري شدند. تعداد 10 دم اپيديديم از شترهاي بالغ كشتار شده جمع‌آوري شد و براي تهيه مايع غني از اسپرم جداسازي، برش و شستشو داده شدند. اسپرم‌هاي اپيديديم و انزال شده براي انجماد مورد پردازش قرار گرفتند. اسپرم‌هاي اپيديديم و انزال شده منجمدذوب شده و تازه از لحاظ تحرك، زنده ماني، انسجام غشا و آكروزوم بررسي شدند. اسپرم‌هاي اپيديديم و انزال شده منجمدذوب شده براي تلقيح اووسيت‌هاي بالغ شتر در شرايط آزمايشگاهي مورد استفاده قرار گرفتند. نتايج نشان دادند كه حركت پيشرونده اسپرم‌هاي تازه جمع‌آوري شده از ناحيه اپيديديم به طور معني‌داري (P<0.05) بيشتر از اسپرم‌هاي انزال شده بود (به ترتيب، 75/1 ± 25/49 در مقابل 5/1 ± 5/38 درصد). شاخص زنده ماني اسپرم‌هاي اپيديديم به طور معني‌داري (P<0.05) بيشتر از اسپرم‌هاي انزال شده بود (به ترتيب، 45/2 ± 63/96 در مقابل 08/4 ± 00/84). انسجام غشا و آكروزوم پس از ذوب اسپرم‌هاي اپيديديم به طور معني‌داري (P<0.05) بيشتر از اسپرم‌هاي انزال شده بود. ميزان مورولا و بلاستوسيست اووسيت‌هاي شتر بارور شده در محيط آزمايشگاه توسط اسپرم‌هاي اپيديديم منجمدذوب شده (به ترتيب، 8/0 ± 4/59، 7/0 ± 12/19 و 7/0 ± 29/10) به طور معني‌داري (P<0.05) بيشتر از اسپرم‌هاي بارور شده توسط اسپرم‌هاي انزال شده منجمدذوب شده بودند (به ترتيب، 1/3 ± 27/48، 1/1 ± 63/11 و     8/0 ± 43/5 درصد). در نتيجه، اسپرم‌هاي اپيديديمي منجمد شتر درومداري قابليت تحمل انجماد، بارورسازي اووسيت‌ها و توليد جنين‌ها را در محيط آزمايشگاهي بهتر از اسپرم‌هاي انزال شده دارند.

The present study aimed to compare the in vitro fertilizing capacity of frozen-thawed ejaculated and epididymal spermatozoa in order to standardize the semen preparation protocol for camel in vitro fertilization (IVF). Semen samples were collected from 7 Dromedary camels by means of artificial vagina (AV). Ten cauda epididymes were obtained from slaughtered adult camels, isolated, incised and rinsed for obtaining the sperm rich fluid. Ejaculated and epididymal spermatozoa were processed for cryopreservation. Fresh and frozen-thawed ejaculated and epididymal spermatozoa were evaluated for motility, livability, membrane and acrosomal integrities. Frozen-thawed ejaculated and epididymal spermatozoa were used to fertilize camel mature oocytes in vitro. The results showed that, the progressive motility of freshly collected epididymal spermatozoa was significantly (P<0.05) higher than ejaculated spermatozoa (49.25 ± 1.75 vs. 38.50 ± 1.50%, respectively). The viability index of epididymal spermatozoa was significantly (P<0.05) higher than that of ejaculated spermatozoa (96.63 ± 2.45 vs. 84.00 ± 4.08, respectively). The post-thaw acrosome and membrane integrities of epididymal spermatozoa were significantly (P<0.05) higher than those of ejaculated spermatozoa. Morula and blastocyst rates of camel oocytes in vitro fertilized by frozen-thawed epididymal spermatozoa (59.4 ± 0.8, 19.12 ± 0.7 and 10.29 ± 0.7%, respectively) were significantly (P<0.05) higher than those fertilized by frozen-thawed ejaculated spermatozoa (48.27 ± 3.1, 11.63 ± 1.1 and 5.43 ± 0.8%, respectively). In conclusion, the Dromedary camel frozen epididymal spermatozoa have the capacity to endure cryopreservation, fertilize oocytes and produce embryos in vitro better than ejaculated sperm.