Author/Authors :
الخفاجي, خلود عبد الآله وزارة العلوم والتكنولوجيا - دائرة البحوث الزراعية وتكنولوجيا الاغذية - مركز الهندسة الوراثية, العراق , الحطاب, زھرة نوري وزارة العلوم والتكنولوجيا - دائرة البحوث الزراعية وتكنولوجيا الاغذية - مركز الهندسة الوراثية, العراق , نعمة, نضال جامعة بغداد - كلية التربية ابن الهيثم - قسم البايولوجي, العراق , علي, وصال ھشام محمد وزارة الصناعة - مركز الرازي, العراق
Abstract :
تم الحصول على خلايا منزوعة الجدران لبكتريا النوع B.Subtilis وبكفاءة 90 % بعد حضن لمدة نصف ساعة باستعمال Ethylen ediamine tetra acetic acid (EDTA) والانزيم الحال .Lysozyme وامكن تحويل الخلايا المنزوعة الجدران بناقل الكلونة pUB110 وبكفاءة تحول 104 خلية/ملغرام من الدنا لناقل الكلونة ونتج عنه الحصول على خلايا مقاومة للمضاد الحيوي الكانامايسين عندما زرعت البكتريا المتحولة على وسط اعادة التكوين الحاوي على مضاد الكانامايسين. اًستعملت ثلاثة طرائق لاستخلاص الدنا من الخلايا المتحولة وامكن التحري عن وجود ناقل الكلونة في مُستخلص الطرق الثلاث وقد اعطت طريقة الترسيب بالملح ناتجا كبيرا من الدنا مع مسحة واسعة من الدنا الكروموسومي مقارنة بالطريقتين الاخريتين بينما اظهر الترحيل الكهربائي لمُستخلص الدنا بطريقة CTAB نقاوة المُستخلص مقارنة مع المُستخلصات الاُخرى.