تقدير الوزن الجزيئي للكلوبيولين المناعي النوعي IgY المستخلص والمنقى من صفار البيض وتقيم فعاليته ضد نوع الطفيلي Eimeria tenella في الدجاج

تم الحصول على عزلة محلية من الطفيلي Eimeria tenella من خلال اخذ منطقة الأعورين من 850 عينة من مجازر ذبح الدجاج في مدينة الرمادي، وبعد تنقيتها وتبويغها خارج الجسم الحي شخصت من خ لال شكل وحجم الطفيلي ومنطقة الإصابة، كما تم تأكيد تشخيص العينة في المستشفى البيطري/ الرمادي، ځصل على عتره التحدي من خلال تقوية العزلة و تكثيرها في دجاج فروج لحم نوع 308 Ross خمس مرات، تم تكسير الطفيلي بواسطة جهاز الموجات فوق الصوتية Sonicater و استخراج Sporocyst و Sporozoite حقنت العترة الضارية Challenge Strain (المستضد بعد ذلك في الدجاج البياض نوع Lohmann في مناطق مختلفة تحت الجلد وفي عضلة الصدر وعضلة الفخذ وعضلة الرقبة بعد مزجها مع محلول Freund's incomplete oil adjuvant، جمع البيض منذ اليوم الأول من الجرعة الأولى وحتى نهاية الجرعة الرابعة المراقبة تتابع زيادة الكلوبيولين المناعي IgY في صفار البيض، أستخلص الكلوبيولين المناعي IgY من ص فار البيض بشكل يومي وتمت ديلزته وترحيل البروتين المستخلص الخام بواسطة تقنية الترحيل الكهربائي العمودي Electrophoresis مع بعض البروتينات القياسية، وقياس تركيز البروتين الخام بواسطة جهاز المطياف الضوئي Spectrophotometer على طول موجي 540 نانومتر حسب طريقة بايوريت إذ بلغ أعلى مستوى له 137.12609 ملغم/ بيضة، تم فصل IgY باستخدام تقنية كروماتوكرافيا العمودColumn Chromatography المعبأ بهلام Sephacryl S300 HR بارتفاع 95 سم وقطر 1.6 سم وتقدير وزنه الجزيئي من خلال فصل صبغة 2000 Blue Dextran وسبعة بروتينات قياسية مختلفة الأوزان الجزيئية لعمل المنحنى القياسي، بعد ذلك اجري للعينة (IgY) مسح ضوئي Spectra Scanning لتحديد الطول الموجي المناسب من خلال قياس أعلى قمة، إذ تم الحصول على أعلى قمة في الطول الموجي 280 نانوميتر وبلغت 0.749، كما تم قياس تركيز IgY المستخرج بعد الفصل بالعمود بواسطة Spectrophotometer وعلى طول موجي 280 نانوميتر، إذ بلغ أعلى مستوى له 117.61764 ملغم بيضة، تم ترحيل IgY بواسطة Electrophoresis مع IgG القياسي للكشف عن حزمة الكاما كلوبيولين، أجري كشف التلازن عن IgY مع العترة الضارية بواسطة استخدام اختبار Double immunodiffusion Ouchterlony test Log Single radial immunodiffusion test لمعرفة مدى تخصصه ضد نوع العزلة واستخراج التركيز الملائم لاستخدامه كعلاج في التجارب اللاحقة، تم حفظ عينة IgY بواسطة التجميد بدرجة -4م، أظهرت النتائج وجود فروق معنوية بين المعاملات من ناحية التغيرات الدمية والمصلية وان أفضل وسيلة للعلاج كانت عن طريق إعطاء العلاج بالحقن في الغشاء البريتوني وفي صفار البيض داخل الجسم مقارنة بالسيطرة السالبة ومع بقية المعاملات.