توصيف انزيم (PPO)Polyphenol oxidase المنقى من نبات الخس الشوكي Prickly lettuce (Lactuca serriola L.)

استعمل انزيم منقى من نبات الخس الشوكي سبق الحصول عليھ من دراسة سابقة ، واظھرت النتائج ان الاس الھيدروجيني الامثل لفعالية انزيم PPO بلغ 6.5 ، وكان الانزيم ثابتاً في مدى واسع من قيم الاس الھيدروجيني تراوح بين 5.5-8 ولوحظ حصول زيادة واضحة في الفعالية الانزيمية بازدياد درجة حرارة التفاعل حتى بلغت اقصاھا عند درجة حرارة 35 م ، وبلغت طاقة التنشيط اللازمة لتحويل المادة الاساس الى ناتج 39.7194 كيلو جول.مول^- 1 ، في حين كان الانزيم ثابتا بدرجة حرارة 35 م لمدة 10 دقائق ، وفقد ، الانزيم المنقى فعاليتھ بشكل كامل بعد مرور 5 ايام عند الخزن بدرجة حرارة 25 م ، بينما فقد ما يقارب ( 73 ، 16 )% من فعاليتھ الابتدائية بعد مرور 21 يوم على الخزن بدرجة حرارة (18 -4 ) م على التوالي ولوحظ وجود ارتباط تساھمي بين الجزء الكربوھيدراتي والبروتيني في الانزيم المنقى ، واتضح بان الانزيم المنقى يحوي على 7.2 % كربوھيدرات . اظھر استعمال كلا من و Sodium metabisulphite و L-Cystein Dithiothretol بتركيز ( 1 و 10 ) ملي مولار نسبة تثبيط عالية للانزيم المنقى تلاه من حيث التاثير كلا من ، Potassium cyanide و EDTA ثم L-Ascorbic acid و citric acid بينما اظھر و Thiourea Sodium benzoate تاثير تثبيطيا اقل ، وبلغت قيمة ثابت ميكالس (Km) 4.762 ملي مولار بينما كانت السرعة القصوى 0.0588 (Vmax) ملي مولار/دقيقة في حين كانت معامل (Km/Vmax) للانزيم المنقى 0.01235 دقيقة ^- 1 باستعمال Catechol مادة اساس .