دراسة بعض الخصائص الفيزيائية والكيميائية لانزيم الستافيلولايسين Staphylolysin المنقى من بكترياالـ Pseudomonas aeruginosa

درست بعض خصائص أنزيم الستافيلولايسين (A (Staphylolysin و D المنقى من بكتريا P16 ، P5 Pseudomonas aeruginosa على التوالي فكان الوزن الجزيئي 20.417 كيلو دالتون و 23.988 كيلو دالتون للستافيلولايسين A, D على التوالي عند تقديرهما بطريقة الترحيل الكهربائي في هلام SDS-PAGE. لوحظ أن الرقم الهيدروجيني الأمثل لفعالية الستافيلولايسين A هو 8 إذا أعطى فعالية بلغت 150 وحدة / مل٬ و لثبات الأنزيم 7.5-8.5 إذ احتفظ الأنزيم بكامل فعاليته تقريبا٬ فيما كان الرقم الهيدروجيني الأمثل لفعالية الستافيلولايسين D هو 9.5 إذ أعطى أعلى فعالية بلغت 16 وحدة / مل٬ و لثبات الأنزيم 8.5-9.5 إذ احتفظ الأنزيم بكامل فعاليته تقريبا٬ و ظهرت أقصى فعالية للأنزيمين عند درجة حرارة 40 م إذ بلغت الفعالية النوعية للستافيلولايسن A 140 وحدة / مل و للستافيلولايسين D 16.4 وحدة / مل٬ و احتفظ كلا الأنزيمين بكامل فعاليتهما تقريبا عند حضنها بدرجة حرارة 25-40 م لمدة ساعة. عند دراسة تأثير بعض المواد في الفعالية الأنزيمية الستافيلولايسين ((Staphylolysin A, D كان لكلوريد الصوديوم و كلوريد البوتاسيوم بتركيز 1 و 5 ملي مولار تأثير منشط للفعالية الأنزيمية قياسا بالسيطرة إذ احتفظ أنزيم الستافيلولايسينA, D ب 105 %٬ 108 % و 102 %٬ 104 % من فعاليتهما على التوالي عند معاملتهما بكلوريد الصوديوم بينما احتفظ كلا الأنزيمين ب 110 %، 114 % و 133 %٬ 118 % من فعاليتهما على التوالي عند معاملتهما بكلوريد البوتاسيوم. ثبطت الفعالية الأنزيمية لكلا الأنزيمين عند معاملتهما بكلوريدات الحديد و الزئبق و الخارصين و بنسب متفاوتة٬ إذ احتفظ أنزيم الستافيلولايسين A ب 73 % و 7 % من فعاليته الابتدائية على التوالي عند معاملته ب 5 ملي مولار من كلوريد الحديد و الزئبق على التوالي٬ و 9 % فقط من فعاليته عند معاملته ب 0.1 ملي مولار من كلوريد الخارصين٬ فيما احتفظ أنزيم الستافيلولايسين D ب 45 % و 13 % من فعاليته فقط عند معاملته ب 5 ملي مولار من كلوريد الحديد و الزئبق على التوالي٬ 23 % فقط من فعاليته عند معاملته ب 0.1 ملي مولار من كلوريد الخارصين٬ بينما احتفظ كلا الأنزيمين بكامل فعاليتهما عند المعاملة بمادة EDTA بتركيز 10 ملي مولار٬ و فينيل مثيل سلفونيل فلورايد (PMSF) بتركيز 0.4 ملي مولار. هذه النتائج تشير إلى أن أنزيمي الستافيلولايسين من الأنزيمات المعدنية (Zn -metallo endopeptidase).