نقش اسيد رتينوئيك و بستر آستروسيت در تمايز سلول هاي بنيادي هيپوكامپ

سابقه وهدف سلول هاي بنيادي،سلول هايي چند استعدادي مي باشند كه از نواحي متفاوتي از بدن يك موجود زنده استخراج مي گردند. اين سلول ها در محيط كشت با استفاده از فاكتورهاي متفاوت رش و لايه تغذيه كننده سلولي قابليت تكثير و تمايز براي مدت زمان طولاني را دارا مي باشند لايه تغذيه كننده سلولي آستروسيت كه با استفاده از فاكتور سيتوزين آرابينوزيد غير فعال گرديده قابليت تمايز سلول هاي بنيادي كشت داده در سطح خود را به ديگر سلول ها دارا مي باشد0 هدف اطلي اين پژوهش تمايز سلول هاي بنيادي هيپوكامپ با استفاده ازاين لايه مغزي و فاكتورهاي رشد اسيد رتينوئيك وايزومر آن 9- RAcis به سلول هاي توليد كننده اپسين است. مواد و روش ها در اين تحقيق ازجنين 18 روزه موش نژاد اسپراگوداولي استفاده شد0 در روز 18 مادر سزارين و مغز جنينها خارج بلافاصله داخل محلول HBSS قرار داده شد سپس با استفاده از روش Banker هيپوكامپ ها را جدا شد و با روش Fishbach سلولهاي آن جداگرديد. سلولهاي به دست آمده در داخل فلاسك 25cm2 كشت داده شد، بعد از 3 روز سلولها را با استفاده از تريپسين از كف فلاسك جدا ودر دو مقدار با دانسيته بالا200000 و دانسيته پائين 20000 سلول در داخل پليت 6 خانه، كشت داده شد منتها قبل از انتقال سلولها كف رولهاي پليت را يك رديف با Poly L lysin و رديف ديگر را با آستروسيتهاي غير فعال پوشش داديم. مدت 4 روز سلولها در محيط كامل DMEM/F12 و %10 FBS نگهداري نموده و سپس به مدت 6 روز دوزهاي متفاوتATRA و RAcis-9 به چك هاي پليتهااضافه گرديد.در پايان با استفاده از منوكلونال آنتي بادي سلولها بررسي شدند. يافته ها بعد از مدت6 روزاضافه كردن فاكتورهاي فوق به سلول هاي موجود درهر چاهك پليت محيط كشت بودن دوز100nM از9 -RAcis و 500nM از ATRA بيشترين سلولهاي تمايز يافته به دست آمد و در پليتهائي كه ازبستر پلي ايزين به عنوان لايه مغزي استفاده شدتمايزي مشاهده نگرديد. همچنين تمايزدردانسيته سلولي بيشتر از دانسيته پايين بوده است. نتيجه گيري بستر آستروسيت و فاكتورهاي خارجي مانندايزومرهاي اسيد رتينوئيك قابليت تمايز سلولهاي بنيادي هيپوكامپ به سلول هاي توليد كننده اپسين را دارا مي باشند.