Author/Authors :
مهرور, نرجس دانشگاه آزاد اسلامي واحد تهران شمال - گروه ميكروب شناسي, تهران, ايران , اخوان سپهي, عباس دانشگاه آزاد اسلامي واحد تهران شمال - گروه ميكروب شناسي, تهران, ايران , عظيمي راد, معصومه دانشگاه علوم پزشكي شهيد بهشتي - مركز تحقيقات گوارش و بيماريهاي كبد, تهران, ايران , ميرسعيدي, كيانا دانشگاه علوم پزشكي ايران - بيمارستان حضرت علي اصغر (ع), تهران, ايران , زالي, محمدرضا دانشگاه علوم پزشكي شهيد بهشتي - مركز تحقيقات گوارش و پيوند كبد, تهران, ايران
Abstract :
سابقه و هدف
سالمونلا از مهمترين پاتوژنهاي ايجاد كننده اسهال و بيماري هاي ناشي از غذا در انسان مي باشد. بيماري اغلب توسط مواد غذايي مانند گوشت ومرغ آلوده به انسان سرايت مي كند. به دليل اهميت اين ارگانيسم به عنوان يكي ازپاتوژنهاي بيماريزا، نياز به شناسايي و تشخيص سريع آن توسط روش هاي مولكولي مي باشد. هدف از اين مطالعه بررسي حساسيت تكنيك PCR-Ribotyping در شناسايي سويه هاي سالمونلا مي باشد.
مواد وروش ها
اين نوع مطالعه از نوع توصيفي بوده شامل40 سويه سالمونلاي جداشده از بيماران مبتلا به اسهال در طي سالهاي 1384-1380 بودند.
پس از تعيين نوع سروتيپ آنها، DNA با روش فنل/ كلرفرم استخراج شد و تكنيك PCR-Ribotyping توسط پرايمرهاي P1 و2 P مربوط به ژن 16S-23SrRNA انجام گرفت. در نهايت محصول PCR برروي ژل آگارز. /.8/1با ولتاژ 120 به مدت 90 دقيقه الكتروفورز شد و بعد از رنگ آميزي ژل با اتيديوم برومايد آناليز صورت گرفت.
يافته ها
40 نمونه سالمونلا شامل سروتيپ هاي پاراتيفي A، پاراتيفي B، پاراتيفي C، پاراتيفي D و سروتيپ تيفي داراي 5 باند مشابه درحد فاصل bp 2500-700 بودند. سروتيپ هاي مختلف سالمونلا، حاوي باندهاي يكسان در مناطق مشابه بودند.
نتيجه گيري
با توجه به نتايج بدست آمده مي توان گفت تكنيك PCR-Ribotyping داراي حساسيت بالاجهت شناسايي سويه هاي سالمونلا در حد جنس مي باشد ولي براي تعيين نوع سروتيپ از حساسيت زياد برخوردار نمي باشد.
Keywords :
Ribotyping , PCR , اسهال , سالمونلا , حساسيت