تهيه و تخليص آنتي بادي هاي پلي كلونال عليه آنتي ژن هاي مايكوباكتريوم آويوم پاراتوبركلوزيس در خرگوش

زمينه و هدف بيماري يون يك آنتريت گرانولوماتوزي مزمن در نشخوار كنندگان است و تهديد كننده سلامتي دام ها در سراسر دنيا است. در سال هاي اخير محققين آنتي ژن هاي مايكوباكتريوم آويوم پاراتوبركلوزيس را براي شناسايي يك تست تشخيصي حساس مورد توجه قرار داده اند؛ لذا شناسايي آنتي بادي ها عليه آنتي ژن هاي پيكره MAP، جهت تشخيص يا توليد واكسن موثر مي باشد. اين مطالعه با هدف تهيه و تخليص آنتي بادي ها عليه آنتي ژن هاي مايكوباكتريوم پاراتوبركلوزيس اجرا شد. مواد و روش ها ايمونيزاسيون خرگوش طي برنامه زمان بندي مشخص به وسيله آنتي ژن هاي MAP و ادجوانت فروند انجام گرديد. خون گيري از خرگوش و جداسازي سرم صورت پذيرفت. ايمونوگلوبولين هاي سرم به روش ترسيب با آمونيوم سولفات 35% از سرم جدا شد و تخليص IgG با كروماتوگرافي تعويض يوني (DEAE-celloluse) انجام گرفت. در نهايت براي بررسي واكنش آنتي ژن ها با آنتي بادي هاي تخليص يافته تست سرولوژيك بكارگرفته شد. نتايج يك پيك با استفاده از كروماتوگرافي IgG بدست آمد و SDS-PAGE، فراكسيون هاي حاصل از يك باند منفرد را براي IgG نشان داد. IgG حاصل در تست سرولوژيك استفاده شد و خطوط رسوبي حاصله تا رقت 16/1 تاييدي بر پاسخ مثبت آنتي بادي هاي پلي كلونال به آنتي ژن ها بود. نتيجه گيري در اين مطالعه القاي پاسخ ايمني در خرگوش براي توليد آنتي بادي پلي كلونال با تيتر بالا انجام گرديد و آنتي بادي هاي تخليص شده در پاسخ به آنتي ژن هاي MAP واكنش مثبت نشان دادند. آنتي بادي هاي پلي كلونال نسبتا ارزان و در مقادير بالا قابل توليد مي باشند و قادر به اتصال به جايگاه هاي بيشتري در سطح آنتي ژن مي باشند. شناسايي آنتي بادي ها توسط تست هاي سرولوژيكي مي تواند در مطالعه بيماري هاي MAP با اهميت باشد.