Isolation and characterization of Ornithobacterium rhinotracheale in the commercial turkey, quail flocks and domestic pigeons by bacteriological and molecular methods

اورنيتوباكتريوم رينوتراكيال، باكتري بيماري‌زاي تنفسي است كه از گونه‌هاي متعددي از پرندگان در سرتاسر جهان جدا شده است. مطالعه حاضر با هدف جداسازي و تعيين مشخصات اين باكتري از بوقلمون، بلدرچين و كبوترهاي اهلي در ايران طراحي و اجرا شده است. بدين منظور از سه گونه مورد بررسي، 250 سوآب نايي نمونه‌گيري شد. به‌علاوه، نمونه‌هاي بافتي از ناي و ريه به تعداد 250 عدد از بوقلمون‌ها و 50 عدد از بلدرچين‌هاي كشتار شده و 100 عدد از كبوترهاي تلف شده نيز همانند سواب‌هاي نايي از نظر وجود اورنيتوباكتريوم به روش كشت مورد بررسي قرار گرفتند. نمونه‌هاي به‌دست آمده از بافت‌هاي تنفسي، هم‌چنين از نظر وجود DNA باكتري به روش واكنش زنجيره‌اي پليمراز مورد ارزيابي قرار گرفتند. به‌طور كلي، 30 جدايه شامل 4 جدايه از بوقلمون، 3 جدايه از بلدرچين و 23 جدايه از كبوتر به روش باكتري‌شناسي شناسايي و سپس توسط واكنش زنجيره‌اي پليمراز تاييد شدند. نتايج بررسي مولكولي در بافت‌هاي تنفسي نيز نشان‌دهنده آلودگي 20%، 50% و 35% نمونه‌هاي بافتي به ترتيب در بوقلمون‌، بلدرچين و كبوتر بود. از نظر ريخت‌شناسي پرگنه، 5 جدايه از كبوتر و هر 4 جدايه از بوقلمون پرگنه‌هايي با اندازه كوچك‌تر نسبت به ساير جدايه‌ها ايجاد كردند، در حالي كه ساير جدايه‌ها پرگنه‌هايي بزرگ‌تر داشتند. در حدود، 50 % جدايه‌ها با پرگنه‌هاي بزرگ‌تر، برخلاف جدايه‌هاي با پرگنه‌هاي كوچك، داراي توانايي جمع كردن گلبول‌هاي قرمز (هماگلوتيناسيون) بودند. تمام جدايه‌ها نسبت به آنتي‌بيوتيك‌هاي دانوفلوكساسين و كلرامفنيكل حساس بودند، در حالي‌كه بيش از 90 درصد جدايه‌هاي كبوتر در برابر آمپي‌سيلين و تمام جدايه‌هاي بوقلمون و بلدرچين به‌همراه 30% جدايه‌هاي كبوتر در برابر تتراسايكلين مقاومت نشان دادند. مقايسه توالي نوكليوتيدي قسمتي از ژن تحت‌واحد 16S RNA ريبوزومي جدايه اورنيتوباكتريوم بدست آمده از هر سه گونه پرنده، همانندي در حد 100-98% با ساير جدايه‌هاي باكتري مذكور در بانك ژن را نشان داد.

Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) is a respiratory pathogen which has been isolated throughout the world from numerous bird species. The present study was designed to isolate and characterize the ORT from domestic turkeys, quails and pigeons. For this purpose, 250 samples from each bird species (turkey, quail and pigeon) with or without respiratory signs were tested by taking of tracheal swabs. In addition, respiratory tissue samples (tracheal and lung), from 250 slaughtered turkeys, 50 slaughtered quails and 100 dead pigeons were also subjected to culture for ORT as tracheal swabs. Respiratory tissues were also tested for bacterial DNA by using polymerase chain reaction (PCR). In general, 30 isolates including 4 isolates from turkeys, 3 isolates from quails and 23 isolates from pigeons were identified as ORT by bacteriological method and then confirmed by PCR. Bacterial DNA was detected in 20%, 50% and 35% of respiratory tissues in turkeys, quails and pigeons respectively. Five ORT isolates from pigeon and all four isolates from turkey showed smaller colony size, while other isolates had larger colonies when cultured in blood agar. Fifty percent of the isolates with larger colony but none of the isolates with small colony size could agglutinate red blood cells (RBCs). All of the isolates were sensitive to danofloxacin and chloramphenicol while more than 90% of pigeon isolates were resistant to ampicillin. All of turkey and quail and 30% of pigeon isolates were resistant to tetracycline. Our ORT isolates showed high identity (98%- 100%) in sequence of 16S rRNA gene to related data in GeneBank.