Identification of Gyrodactylus gurleyi in Carassius auratus using morphometric and molecular characterization

زمينـه مـطالعه‌: انگل ژيروداكتيلوس از دسته كرم‌هاي پهن مونوژن (تك ميزبانه) و جز انگل‌هاي خارجي مهم ماهي‌هاي پرورشي و ماهي‌هاي آزاد آبهاي شيرين و آبهاي شور و ماهي‌هاي زينتي محسوب مي شود كه مي‌تواند سبب ايجاد بيماري و خسارات اقتصادي قابل توجهي گردد. اين انگل يكي از شايع‌ترين انگل‌هاي ماهي به ويژه در خانواده كپورماهيان مي باشد. ماهي كاراسيوس اوراتوس ( ماهي طلايي) يكي از ماهي‌هاي خانواده كپور ماهيان است كه بسيار مستعد آلودگي و بيماري با انگل ژيروداكتيلوس مي باشد .هدف:‌ ‌هدف از اين مطالعه شناسايي گونه انگل ژيروداكتيلوس بر اساس ويژگي‌هاي مورفومتريك و مولكولي در ماهي زينتي كاراسيوس اوراتوس مي باشد. روش كار:در اين مطالعه انگل‌هاي ژيروداكتيلوس از سطح بـدن و بـاله‌‌هاي نمونه‌هاي ماهي كاراسيوس اوراتوس جداسازي شدند. ويژگي‌هاي مورفولوژيك (ريخـت شنـاسـي) هـر يـك از انگل‌ها بر اساس كليدهاي تشخيصي با استفاده از عكسبرداري، ترسيم و اندازه گيري قسمت‌هاي مختلف اپيستهاپتور انگل انجام شد. بررسي مولكولي گونه انگل ژيروداكتيلوس با استفاده از روش PCR ‌قسمتي از توالي ‌ S8/5 ژن ريبوزوم RNAو قسمتي ازتوالي 2‌ITS ژن ريبوزوم ‌ RNAمورد ارزيابي قرار گرفت. سپس توالي به دست آمده از محصول PCR با توالي‌هاي ثبت شده انگل ژيروداكتيلوس در ژن بانك مورد مقايسه قرار گرفت. نتايج:بر اسـاس بررسي مورفومتريك و تعيين توالي، نمونههاي انگل ژيروداكتيلوس در اين مطالعه ژيروداكتيلوس گرليي معرفي شدند. نتيجه‌گيري‌نهايي:‌ ‌با توجه به اين مسيله كه شناسايي انگل ژيروداكتيلوس تنها بر اساس خصوصيات مورفولوژي به علت اندازه كوچك انگل (كمتر از يك ميليمتر)، تغيير مورفولوژي ناحيه اپيستهاپتور انگل تحت شرايط مختلف جغرافيايي، نوع ميزبان و درجه حرارت آب، تعداد بسيار زياد گونه هاي اين انگل (بيش از بيست هزار گونه) و شناسايي بسيار اندك اين گونه ها (حدود تنها چهارصد گونه تا كنون) كار مشكل و غير مطميني است، بررسي ملكولي تشخيص مورفولوژي را مورد تاييد قرار مي‌دهد. بنابراين استفـاده از بـررسـي مـورفـومتـريـك به همراه استفاده ازتكنيك مولكولي بهترين روش براي دستيابي به شناسايي صحيح گونه‌هاي انگل ژيروداكتيلوس و معرفي گونه‌هاي جديد اين انگل مي باشد.

BACKGROUNDS: Gyrodactylus is a small monogenean ectoparasite that lives on the skin and fins of most of the worldʹs fish species. Gyrodactylus appears to be one of the most prevalent parasites found in ornamental fish, especially in Cyprinids. Goldfish (Carassius auratus) are a popular ornamental fish that are highly contaminated by Gyrodcatylus. OBJECTIVES: The present study is aimed to identify morphological and molecular character-istics of the Gyrodactylus parasite on gold fish. METHODS: The morphological identification of Gyrodactylus specimens was performed using the measurements and drawings of opisthaptoral hard parts of the parasites. The molecular species description was based on a polymerase chain reaction (PCR) of partial sequence of the 5.8S region of ribosomal RNA, and a partial sequence of the internal transcribed spacer 2 (ITS2) of ribosomal RNA. The nucleotide sequences of the PCR products were compared with corresponding sequencing registered in GenBank. RESULTS: Based on the morphometric analysis and sequencing, the Gyrodactylus specimens were described as Gyrodactylus gurleyi. CONCLUSIONS: A combination of molecular techniques with morphological analysis seems to be the best approach for the identification of Gyrodactylus speices.