Transcriptional effects of metal ions on the bovine oxytocin and the thymidine kinase-ERE promoter through the estrogen receptor a in MDA-MB 231 breast cancer cell line

زمينـه مـطـالعـه: بـرخـي از يـون‌هاي فلزي به عنوان آلوده كننده‌ي محيط داراي خصوصيات استروژنيك نيز مي‌باشند. اين تركيبات زنواستروژنيك مي‌توانند در برخي ارگان‌ها موجب سرطانزايي شوند. مكانيسم سرطانزايي اين يون‌هاي فلزي هنوز مشخص نمي‌باشد. هدف: در اين مطالعه اثرات ترجمه‌اي برخي از يون‌هاي فلزي بر روي ژن اكسي توسين گاوي و پروموتور تيميدين كيناز‌ _ ERE توسط گيرنده ي نوع آلفا استروژن در سلول‌هاي لاين سرطاني سينه ‌231 MDA-MB مورد بررسي قرار گرفته است. روش كار: سلول‌ها در فلاسك‌هاي ‌2cm 75 با تراكم يك سوم يا در پليت‌هاي 24 چاهكي ‌(Nunc)‌ با تعداد ده هزار سلول در هر چاهك قرار داده شده و سپس با استفاده از mg3DNA پلاسميد با استفاده از روش coprecipitation كلسيم فسفات ترانسفكشن صورت گرفت. استروژن و برخي از يون‌هاي فلزي جهت تحريك سلـول‌هاي ترانسفكت شده مورد استفاده قرار گرفت. نتايج: نتايج اين مطالعه نشان داد كه يون‌هاي مس و كادميوم باعث افزايش فعاليت پروموتور اكسي توسين شده و يون‌هاي كبالت و احتمالاً جيوه به طور معني‌داري باعث فعال شدن پروموتور كنترل شده‌ي ERE شده و ديگر يون‌هاي فلزي باعث افزايش معني‌دار در فعاليت رونويسي نشدند. نتيجه‌گيري نهايي: نتايج اين مطالعه نشان داد كه، برخي يون‌هاي فلزي فعايت استروژنيك از نوع كلاسيك يا غير كلاسيك از خود نشان داده، همچنين برخي ديگر از يون‌هاي فلزي فعاليت استروژنيك با مكانيسم ناشناخته در سلول‌هاي لاين 231 MDA-MB از خود نشان دادند.

BACKGROUND: Some of metal ions as environmental pollutants show estrogenic activity. This xenostrogenic compounds can be caused carcinogenicity in organs. The mechanism of carcinogenicity of metal ions is not clarified. OBJECTIVES: In this study, we investigated the Transcriptional effects of variety of metal ions on the bovine oxytocin and the thymidine kinase-ERE promoter by estrogen receptor a in MDA-MB 231 breast cancer cell line. METHODS: Cells were plated into flask (75cm2) at 1.3 density or into 12- well plates (Nunc) at a density of 100000 cells per well and were transfected with a total of 3 µg of plasmid DNA using calcium phosphate coprecipitation. Oestrogen and some metal ions were used for stimulation of transfected cells. RESULTS: Our results showed that copper and cadmium ions activating specifically the oxytocin promoter, and cobalt and possibly, mercury ions activating specifically the ERE-controlled promoter and the majority of the ions did not affect transcriptional activation significantly. CONCLUSIONS: The study revealed that some metal ions show estrogenic activity by classical or non-classical mechanisms as well as some metal ions exhibit estrogenic activity by undetermined mechanisms in transfected MDA-MB 231 cell line.