A Serological and Molecular study on Toxoplasma gondii infection in sheep and goat in Tabriz

توكسوپلاسموزيس يك بيماري مشترك بين انسان و حيوان است كه عامل آن تك ياخته توكسوپلاسما گونديي مي باشد. اين عفونت از طريق خوردن آب و غذاي آلوده به مدفوع گربه بيمار و يا خوردن گوشت خام آلوده ايجاد مي گردد. براي تعيين ميزان آلودگي، تعداد 186 نمونه سرم خون، 13 نمونه مغز، 13 نمونه كوتيليدون و 34 نمونه خون كامل از اوايل ارديبهشت ماه تا اواخر اسفند ماه 1388 در دفعات مختلف، به طور تصادفي از گوسفند ها و بزهاي كشتاري در كشتارگاه تبريز تهيه و مورد آزمايش اليزا، واكنش زنجيره‌اي پليمراز و nested-PCR قرار گرفتند. براي انجام واكنش زنجيره‌اي پليمراز از چهار جفت پرايمر به ترتيب جفت پرايمر يونيورسال (rRNA s18)، جفت پرايمر ITS1 و جفت پرايمرTg1، Tg2 و جفت پرايمرTg3، Tg4 (nested-PCR) استفاده شد. نتايج آزمايش سرولوژي نشان داد كه آلودگي به انگل توكسوپلاسما گونديي 3/18 درصد است و در واكنش زنجيره‌اي پليمراز ميزان آلودگي در مورد نمونه هاي مغز جنين 69 درصد، نمونه هاي كوتيليدون 23 درصد و نمونه هاي خون 7/14 درصد مي باشد. در مورد نتايج آزمايش سرولوژي ميزان آلودگي گوسفندها 8/24 درصد و ميزان آلودگي بزها 6/10 درصد مي باشد كه داراي ارتباط معني داري هستند(p?0.05). شيوع عفونت در گوسفند ها و بز هاي بالغ بطور معني داري بالاتر از حيوانات جوان مي باشد. همچنين اختلاف معني داري بين گوسفند ها و بز هاي نر (5/10درصد) و گوسفند ها و بز هاي ماده (2/19 درصد) وجود دارد(p?0.05). تعيين DNA توكسوپلاسما گونديي با استفاده از واكنش زنجيره‌اي پليمراز مشكلاتي را كه زمان استفاده از آزمايش سرولوژي براي محققين پيش مي آيد را مي‌كاهد و نيز تشخيص را در موارد پيچيده آسان مي‌كند. حضور اسيد نوكلوييك انگل توكسوپلاسما گونديي در خون و بافت‌هاي جنيني، نشانگر عفونت فعال و يا مادرزادي به توكسوپلاسما مي‌باشد.

Toxoplasmosis is an important zoonotic diseases in human and animals. The disease caused by the protozoan Toxoplasma gondii. To determine the infection rate of toxoplasmosis in sheep and goats in east Azarbaijan province of Iran a total of 186 sera, 13 fetal brains, 13 cotyledons and 34 whole blood samples were collected from sheep and goats in Tabriz abattoir during the year 2010. Serum samples were tested for IgG antibodies against Toxoplasma gondii by Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). This test is used in conjunction with direct and nested PCR techniques for detection of T. gondii DNA in blood, cotyledon and brain of fetuses, using 4 pairs of universal and specific primers, 18SrRNA, ITS-1, (Tg1,Tg2) and (Tg3,Tg4). Antibodies against T. gondii were found in 18.3% serum samples. DNA of T. gondii was detected in 69% of fetal brains, 23% of cotyledons and 14.7% of blood samples. The prevalence rate of T. gondii in sheep was 24.8% and in goats was 10.6% and the significant difference was observed between sheep and goats groups (p?0.05). The prevalence of toxoplasmosis antibodies was significantly higher in adult sheep and goats than younger animals. There was significant difference between male (10.5%) and female (19.2%) sheep and goat was observed (p?0.05). Detection of T. gondii DNA using PCR minimizes the problems which the researcher may face when using serological methods and facilitates diagnosis in complex cases. The presence of T. gondii in blood, fetal tissues and neonatal specimens strongly suggests active and or congenital infection.