عنوان :
شناسائي و تعيين هويت ويروسهاي بيماريزا در ميگو با استفاده از روشهاي نوين به منظور ابداع و معرفي كيتهاي مولكولي تشخيص (كيت بيماريهاي ويروسي ميگو شامل TSV, HPV, MBV)
شرح پديد آور/مجري (مجريان) طرح :
افشارنسب، محمد
شناسه هاي افزوده :
كاظمي، بهرام ، همكار طرح , سپهداري، ابوالفضل ، همكار طرح , شمسي، شكوفه ، همكار طرح , مهرابي، محمدرضا ، همكار طرح , مرتضايي، رضا ، همكار طرح , جرفي، الهام ، همكار طرح , هوشمند، حسين ، همكار طرح , آهنگرزاده، مينا ، همكار طرح , محسني‌نژاد، لفته ، همكار طرح , يگانه، وحيد ، همكار طرح , خليل‌پذير، محمد ، همكار طرح , دشتيان‌نسب، عقيل ، همكار طرح , رادخواه، كوروس ، همكار طرح , تمدني، سعيد ، همكار طرح , صادقي، محمدرضا ، همكار طرح , حسيني، قاسم ، همكار طرح , اژدهاكش‌پور، اشكان ، همكار طرح , حسيني، حسين ، همكار طرح , قاسمي، محدث ، همكار طرح , رمضاني‌عاقله، بابك ، همكار طرح , عابديان، آرمين ، همكار طرح , قره‌وي، بهروز ، همكار طرح , كر، نيازمحمد ، همكار طرح , حامي‌طبري، احمد ، همكار طرح , عبدي، كاظم ، همكار طرح , ناظم‌شيرازي، محمدحسين ، همكار طرح , صيدي، آذر ، همكار طرح , سيميروني، مهدي ، همكار طرح , صيدي، آذر ، همكار طرح , قاجاري، امراله ، همكار طرح , محمودعلوي، رضا ، همكار طرح , حسن‌زاده، محمدرضا ، همكار طرح
تنالگان :
سازمان تحقيقات، آموزش و ترويج كشاورزي - موسسه تحقيقات علوم شيلاتي كشور
چكيده فارسي :
پرورش ميگو در دنيا رشد فزاينده ائي داشته و در سال 2013 به رقم 4/2 ميليون تن رسيد. ايران نيز روزبروز پرورش ميگو در حال گسترش بوده و پيش‌بيني مي‌شود در سال 1393 توليد به رقم 20 هزارتن بالغ گردد. در اين ميان مهمترين چالش در توليد ميگو موضوع بهداشت و بيماريها مي‌باشد. بطوريكه در سال 1393 نيز مجددا بيماري لكه سفيد مزارع پرورش ميگو در چابهار را آلوده نموده و خسارت زيادي به اين صنعت واردنمود. با توجه گسترش فعاليتهاي آبزي پروري در سطح ملي، منطقه ائي و بين المللي، تعداد بيماريهاي نوظهور(emerge) در حال افزايش بوده و روز به روز بر تعداد آنها افزوده ميصشود. در اين ميان نقش بيماريهاي ويروسي از ساير بيماريها بيشتر بوده و اين بيماريها نه موجب كاهش توليد شده، بلكه باعث تاثير منفي بر تجارت و اقتصاد ملي نيز مي‌شوند. بمنظور كنترل و پيشگيري از بيماريهاي ويروسي شناخت روشهاي دقيق و سريع كه بتواند عامل بيماري (ويروس) را در پائين ترين سطوح و مقدار شناسائي و تشخيص نمايد ضروري است. در اين پروژه با استفاده از روش Polymerase Chain Reaction (PCR) كه از حساسيت (Sensitivity) و اختصاصيت (Specificity) و كارائي (Efficiency) بالائي برخوردار و به صورت كيتهاي تجارتي عرضه مي‌شود براي اين منظور استفاده شده است. تاكنون اين كيتها از خارج كشور تامين گرديده است، اما با توجه به تغييرات شديدي كه در سويه هاي ويروس در هر منطقه وجود دارد ضرورت توليد اين كيتها با سويه هاي كه در داخل ايجاد بيماري ميكنند اجتناب ناپذير است. بعنوان مثال تاكنون ويروس سندرم تورا با بيش از 10 سويه بيماريزا در مناطق مختلف ايجاد مرگ ومير در ميگو نموده است كه با توجه به ماهيت ويروس و بروز موتاسيون در آن، سويه هاي هر منطقه از همديگر متفاوت است. لذا ضرورت دارد كيتهائي طراحي شود كه موجب شناخت سويه ايجاد كننده بيماري در داخل كشور گردد. اين حالت براي ساير ويروسها از جمله ويرس بيماري لكه سفيد (White spot syndrome virus) ، ويروس بيماري سر زرد Yellow head virus(YHV)، ويروس بيماري مونودن باكيلو ويروس (Penaeus monodon baculovirus)، ويروس بيماري پارو ويروس هپاتوپانكراس (Hepatopancreatic parvo like virus) ، ويروس بيماري نكروز عفوني بافتهاي خونساز و هيپو درم (Infection hypoderamal and hematopoietic necrosis virus).نيز ميصباشد. در اين پروژه ابتدا ضمن شناسائي ميگوهاي بيمار نسبت به جمع آوري و انتقال آنها به آزمايشگاه اقدام شده و با استفاده از روشهاي معمول ازجمله روش هيستوپاتولوژي، روشهاي شيميائي ،روش ميكروسكوپ الكتروني، روش سنجش بيولوژيك (Bioassy) و كيتهاي تحارتي وارداتي اقدام به تشخيص گرديد. دراين پروژه فقط نسبت به شناسائي ويروس مونودن باكولوويرس(MBV) اقدام و دو ويروس ديگر يعني ويروسهاي تورا (TSV) و ويروس پاروويروس هپاتوپانكراس (HPV) به دليل عدم تخصيص بودجه اقدامي نگرديده است. در اين بيماري ابتدا نسبت به شناسائي ويروس بيماري با استفاده از روشهاي مطالعات باليني، آسيب شناسي، ميكروسكوپ الكتروني و كيت تشخيص IQ2000 اقدام و سپس بيماري تاييد و نسبت به استخراج DNA ويروس ها اقدام گرديد. با استفاده از نرم افزارOligo نسبت به طراحي پرايمر اقدام و با پرايمرهاي توليدي نسبت به شناسائي ويروس اقدام و براي تاييد از كيت نشخيصي IQ2000 استفاده گرديد.تشخيص قطعي ويروس با پرايمر اختصاصي اقدام و با تشكيل باند bp185 حساسيت و احتصاصيت پرايمر طراحي شده مورد بررسي قرار گرفته و تاييد گرديد
چكيده انگليسي :
Shrimp production increasing rapidly in the world and in2013 the production reaches 4.2 MT. In Iran the shrimp production is under development and estimated in 1393, 20 thousand tons produced. In this regards the important subject is health and disease in shrimp farm. The white spot syndrome virus for second time appears in chabahar and damage many farms. Because the aquaculture activity expand in the world in national, regional and international scale, many emerge disease are endanger. In this regard the viral disease is very important and not only decrease the production but also has a side effect in business and national economy. For control and prevention the viral disease, the accurate methods such as PCR kit were developed. In this project the PCR methods with sensitivity, specificity and efficacy was designed and used for detection viral disease. Many viruses have several serotypes and in different area maybe new serotype induce the disease. For this reason, the specific kit will be design. Three viruses consist of MBV, TSV and IHHNV are very pathogenic in shrimp farm and need the specific PCR kit for detection them. In this project the MBV virus was identified and designs a new primer with Oligo software and the primer amplified a part of DNA with 185 bp in the gel. The specificity and sensitivity of primer were checked by IQ2000 Kit and the primer used for detection unknown samples. Key world: Identification, Virus, Kit detection, New molecular methods.
كليدواژه :
شناسائي , ويروس , كيت تشخيصي , روشهاي نوين مولكولي
اطلاعات نشر :
تهران موسسه تحقيقات علوم شيلاتي كشور
مشخصات ظاهري :
بخشي رنگي، جدول، مصور، نمودار
فروست :
موسسه تحقيقات علوم شيلاتي كشور 46602
كتابنامه :
كتابنامه: ص. 62- 64
موضوع :
ميگو- بيماري هاي ويروسي , ميگو- بيماري هاي ويروسي- تشخيص , ميگوي پاسفيد- بيماري هاي ويروسي , ميكرب شناسي تشخيصي
