1621

جداسازي و بررسي خواص بيولوژيك ترپنوئيد از خيار دريايي گونه Holothuria leucospilota

ناظمي، مليكا

احمدي طبا، محمد همكارطرح , گذري، محسن همكارطرح , احمد زاده، اميد همكارطرح , علي دوست سليمي، مهسا همكارطرح , علي دوست سليمي، پريسا همكارطرح , آقا صلواتي، محمدرضا همكارطرح , خزعلي، آيدا همكارطرح , كانزمان، آندريس همكارطرح , ايرانشاهي، مهرداد همكارطرح , پيشه ورزاده، فاطمه همكارطرح , تمدني جهرمي، سعيد همكارطرح , مرادي، يزدان همكارطرح , صدريان، منصور همكارطرح , حبيبي صالح، فاطمه همكارطرح , صفوي، ابراهيم همكارطرح , محمدي ها، مالك همكارطرح , شيخ حسني، فرزين همكارطرح , مطلبي مغانجوقي، عباسعلي همكارطرح

1397

ﺳﺎزﻣﺎن ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت، آﻣﻮزش و ﺗﺮوﯾﺞﮐﺸﺎورزي - ﻣﻮﺳﺴﻪ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻋﻠﻮم ﺷﯿﻼﺗﯽ ﮐﺸﻮر

با توجه به انواع و خواص زيستي خيارهاي دريايي، در اين تحقيق علمي به بررسي خواص سيتوتوكسيك و ضد ميكروبي (ضدقارچ و ضدباكتري) تركيبات ترپنوئيدي استخراج شده از گونه Holothuria leucospilota از جزيره هنگام، خليج فارس پرداخته شده است. در اين پژوهش پودر خشك خيار دريايي با استفاه از استون عصاره گيري شدند. سپس به منظور جداسازي تركيبات ترپنوئيد عصاره از ستون كروماتوگرافي سيليكاژل توسط حلال هاي ان هگزان و اتيل استات شست و شو داده شد و خواص سيتوتوكسيك و ضدميكروبي (ضدقارچ و ضدباكتري) اين تركيبات توسط آزمون XTT روي رده سلول سرطاني KB/C152 و سلول سالم Hek293 و آزمون رقت لوله اي روي سويه باكتري هاي ؛ Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia, Salmonella typhi, Proteus vulgaris, Staphylococcus aureus, Bacillus Bacillus subtilis, Nocardia brasiliensis و سويه هاي قارچ و مخمر Aspergillus fumigatus و Candida albicans مورد سنجش قرار گرفت. تركيبات اسكوالين، آمبرين، رينانولون، لانوسترول، بتاآميرين و لوپئول توسط دستگاه كروماتوگرافي گازي شناسايي شدند. تركيبات؛ اسكوالين، آمبرين و لانوسترول در غلظت هاي 34/3 تا 91/6 ميكروگرم در ميلي ليتر منجر به مرگ پنجاه درصدي سلول هاي اپيتليوم دهاني و جوركت شده اما اثر كشندگي روي سلول هاي جنيني كليه انسان از خود نشان ندادند. تركيبات بتا آميرين، لوپئول و رينانولون در غلظت هاي 13/6 تا 64/45 ميكروگرم در ميلي ليتر منجر به مرگ پنجاه درصدي سلول هاي اپيتليوم دهاني شدند، اما تركيب لانوسترول اثر كشندگي از خود نشان نداده است. تركيبات اسكوالين، لانوسترول، بتا آميرين و لوپئول اثر كشندگي روي باكتري هاي گرم مثبت باسيلوس سوبتيليس، باسيلوس سرئوس و استافيلوكوكوس آرئوس از خود نشان دادند اما اثر آن ها روي باكتري هاي گرم منفي بسيار ضعيف بوده است. تركيبات لانوسترول و بتاآميرين و لوپئول روي مخمر كانديدا آلبيكنس اثر كشندگي داشته اما تنها تركيب لوپئول روي قارچ آسپرژيلوس اثر كشدگي از خود نشان داده است. در اين پروژه كه به بررسي تركيبات ترپنوئيد از خيار دريايي Holothuria leucospilota از جزيره هنگام پرداخته شده است اثر زيستي سيتوتوكسيك روي سلول هاي سرطاني بسيار قوي تر از اثر ضدباكتريايي است، بنابراين تركيبات مورد مطالعه مي توانند به عنوان انتخاب مناسب براي توليد داروهاي ضدسرطان و سپس ضدباكتري مورد استفاده قرار بگيرد

شماره شناسايي :18847038 شماره مدرك:54739 نام عام مواد:[گزارش نهايي -ويژه] شناسه افزوده:ناظمي، مليكا :احمدي طبا ،محمد :گذري ،محسن :احمد زاده ، اميد :علي دوست سليمي ، مهسا :علي دوست سليمي ،پريسا :آقا صلواتي ،محمدرضا :خزعلي ، آيدا :كانزمان ،آندريس :ايرانشاهي ،مهرداد :پيشه ورزاده ،فاطمه :تمدني جهرمي ،سعيد :يزدان مرادي، :صدريان ، منصور :حبيبي صالح ،فاطمه :صفوي ،سيد ابراهيم :محمديها، مالك :شيخ حسني ،فرزين :مطلبي مغانجوقي ، عباسعلي عنوان اصلي:جداسازي و بررسي خواص بيولوژيك ترپنوئيد از خيار دريايي گونه Holothuria leucospilota عنوان اصلي به زبان ديگر::Extraction and survey on biological activities of terpenoids from sea cucumber Holothuria leucospilota صفحه شمار:84ص.:مصور، جدول، نمودار وضعيت انتشار:تهران: موسسه تحقيقات علوم شيلاتي كشور، 1397 فروست:شماره ثبت54739مورخ97/10/09 :شماره طرح 92128-12-75-2 :شماره نامه 247/11818 مورخ1397/10/04 :اين طرح: مقدماتي است :دستاورد برحسب ماهيت: يافته هاي تحقيقاتي اثربخش است :انتشاردرقالب: مقالات علمي ،پژوهشي داخلي وخارجي است شماره ثبت:4221 خلاصه يا چكيده:با توجه به انواع و خواص زيستي خيارهاي دريايي، در اين تحقيق علمي به بررسي خواص سيتوتوكسيك و ضد ميكروبي (ضدقارچ و ضدباكتري) تركيبات ترپنوئيدي استخراج شده از گونه Holothuria leucospilota از جزيره هنگام، خليج فارس پرداخته شده است. در اين پژوهش پودر خشك خيار دريايي با استفاه از استون عصاره گيري شدند. سپس به منظور جداسازي تركيبات ترپنوئيد عصاره از ستون كروماتوگرافي سيليكاژل توسط حلال هاي ان هگزان و اتيل استات شست و شو داده شد و خواص سيتوتوكسيك و ضدميكروبي (ضدقارچ و ضدباكتري) اين تركيبات توسط آزمون XTT روي رده سلول سرطاني KB/C152 و سلول سالم Hek293 و آزمون رقت لوله اي روي سويه باكتري هاي ؛ Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia, Salmonella typhi, Proteus vulgaris, Staphylococcus aureus, Bacillus Bacillus subtilis, Nocardia brasiliensis و سويه هاي قارچ و مخمر Aspergillus fumigatus و Candida albicans مورد سنجش قرار گرفت. تركيبات اسكوالين، آمبرين، رينانولون، لانوسترول، بتاآميرين و لوپئول توسط دستگاه كروماتوگرافي گازي شناسايي شدند. تركيبات؛ اسكوالين، آمبرين و لانوسترول در غلظت هاي 34/3 تا 91/6 ميكروگرم در ميلي ليتر منجر به مرگ پنجاه درصدي سلول هاي اپيتليوم دهاني و جوركت شده اما اثر كشندگي روي سلول هاي جنيني كليه انسان از خود نشان ندادند. تركيبات بتا آميرين، لوپئول و رينانولون در غلظت هاي 13/6 تا 64/45 ميكروگرم در ميلي ليتر منجر به مرگ پنجاه درصدي سلول هاي اپيتليوم دهاني شدند، اما تركيب لانوسترول اثر كشندگي از خود نشان نداده است. تركيبات اسكوالين، لانوسترول، بتا آميرين و لوپئول اثر كشندگي روي باكتري هاي گرم مثبت باسيلوس سوبتيليس، باسيلوس سرئوس و استافيلوكوكوس آرئوس از خود نشان دادند اما اثر آن ها روي باكتري هاي گرم منفي بسيار ضعيف بوده است. تركيبات لانوسترول و بتاآميرين و لوپئول روي مخمر كانديدا آلبيكنس اثر كشندگي داشته اما تنها تركيب لوپئول روي قارچ آسپرژيلوس اثر كشدگي از خود نشان داده است. در اين پروژه كه به بررسي تركيبات ترپنوئيد از خيار دريايي Holothuria leucospilota از جزيره هنگام پرداخته شده است اثر زيستي سيتوتوكسيك روي سلول هاي سرطاني بسيار قوي تر از اثر ضدباكتريايي است، بنابراين تركيبات مورد مطالعه مي توانند به عنوان انتخاب مناسب براي توليد داروهاي ضدسرطان و سپس ضدباكتري مورد استفاده قرار بگيرد. كلمات كليدي: خيار دريايي، متابوليت ثانويه، ترپنوئيد، خواص ضدميكروبي، سيتوتوكسيك، خليج فارس. :The sea cucumber produce natural products with biological activities. As the cytotoxic and antimicrobial activates and abundance of Holothuria leucospilota in the Persian Gulf, survey the cytotoxic nd antimicrobial activity of terpenoids from sea cucumber. In this investigation the powder samples, H. leucospilota were collected on the coastline of Island Hengam, extracted with acetone. Purification of acetone extract was carried out by column chromatography on silica gel with a gradient of n-hexan/ethyl acetate to isolation terpenoids. In vitro cytotoxity and antimicrobial screening, by XTT assay, against KB/ C152 and Hek293 cell line, and broth diluthion against bacterium; Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia, Salmonella typhi, Proteus vulgaris, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Nocardia brasiliensis and fungal Candida albicans and Aspergillus fumigatus. The components; squalene, lanosterol, amberien, ß ambeine, lupeol and renanolone were detected by GC/MS . IC50 for Squalene, lanosterol and amberien extracted from muscle of H. leucospilota were 3.34 - 6.36 µg/ml in KB and Jurkat, they had neither cytotoxic activities in normal cell (Hek293 cell line). IC50 for ß ambeine, lupeol and renanolone extracted of H. leucospilota were 6.13 - 45.64 µg/ml in KB the lanosterol had neither cytotoxic activities in Jurkat cell . Our results showed squalene, lanosterol, ß ambeine and lupeol extracts of sea cucumber were active on Gram-positive bacteria; , Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis ,but they had low antibacterial activities on Gram-negetive bacteria. lanosterol, ß ambeine and lupeol were active on C. albicans. Based our results, terpenoids extracted from sea cucumber can be considered as a source of novel anticancer and antibacterial drug

خيار دريايي , متابوليت ثانويه , ترپنوئيد , خواص ضدميكروبي , سيتوتوكسيك , خليج فارس

تهران ﻣﻮﺳﺴﻪ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻋﻠﻮم ﺷﯿﻼﺗﯽ ﮐﺸﻮر

مصور، جدول، نمودار

ﺳﺎزﻣﺎن ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت، آﻣﻮزش و ﺗﺮوﯾﺞ ﮐﺸﺎورزي - موسسه تحقيقات علوم شيلاتي كشور 54739