شماره ركورد :
1669
عنوان :
بررسي امكان توليد دورگه بين دو گونه تاسماهي ايراني (Acipenser persicus) و تاسماهي سيبري (Acipenser baerii) و مقايسه رشد آن
شرح پديد آور/مجري (مجريان) طرح :
پوركاظمي، محمد
شناسه هاي افزوده :
يزداني، محمد علي ، همكارطرح , يگانه، هوشنگ ، همكارطرح , نوروز فشخامي، محمد رضا ، همكارطرح , حسن زاده صابر، محمد ، همكارطرح , يارمحمدي، مهتاب ، همكارطرح
سال نشر :
1397
تنالگان :
ﺳﺎزﻣﺎن ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت، آﻣﻮزش و ﺗﺮوﯾﺞﮐﺸﺎورزي - ﻣﻮﺳﺴﻪ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻋﻠﻮم ﺷﯿﻼﺗﯽ ﮐﺸﻮر
چكيده فارسي :
در اين پژوهش امكان توليد دورگه حاصل ازتلاقي تاسماهي سيبري × تاسماهي ايراني و مقايسه با گونه هاي خالص با استفاده از روشهاي مورفولوژيكي، مولكولي، سيتوژنتيكي و روند رشد آنها به منظور معرفي دورگه اي جديد از ماهيان خاوياري به صنعت آبزي پروري كه در دو بخش مقايسه رشد طي مراحل لارو (اوزان 46 تا 6607 ميليگرم )، بچه ماهي (اوزان 5/6 تا 750 گرم ) و پرواري (اوزان 600 تا 2000 گرم )و همچنين تعيين جنسيت ماهيان پرورش يافته بعد از گذشت 5 سال اجرا گرديد. براي اين منظور تخمك و اسپرم دو عدد تاسماهي ايراني با دوعدد تاسماهي سيبري (ماده و نر) بصورت رفت و برگشت در 4 تيمار تلاقي داده شد. تيمار 1 تاسماهي ايراني شاهد (والدين نر و ماده تاسماهي ايراني)، تيمار 2 دورگه (نوع I ) حاصل از تلاقي تاسماهي ايراني نر با تاسماهي سيبري ماده و تيمار 3 دورگه (نوعII) حاصل از تلافي تاسماهي سيبري (نر) و تاسماهي ايراني ماده و تيمار 4 تاسماهي سيبري شاهد حاصل از تلاقي والدين نر و ماده تاسماهي سيبري توليد گرديد.براي هر تيمار ، 200 گرم تخمك با يك ميلي ليتر اسپرم لقاح داده شد و پارامترهاي موفومتريك و مريستيك مولدين و بچه ماهيان حاصله ثبت گرديد. براي مقايسه رشد بچه ماهيان شاهد و دورگه ها در سه فاز پرورش طي يك دوره 10 هفته اي مورد مقايسه قرار گرفت.فاز 1 پرورش لاروي از وزن 46 ميلي گرم تا بيش از 6600 ميلي گرم در يك دوره 10 هفته اي انجام شد كه در اين مرحله لاروهاي شاهد و دورگه هر دو هفته يكبار مورد زيست سنجي قرار گرفتند.در فاز دوم پرورش مقايسه رشد در يك دوره 330 روزه انجام پذيرفت و ماهيان از وزن 5/6 گرم تا وزن 750 گرمي با زيست سنجي هر ماه يكبار كه در آن متوسط رشد روزانه (گرم در روز) ضريب تبدل غذايي ، ضريب رشد ويژه ( درصد درروز) در افزايش وزن بدن ، كارايي غذا و نسبت بازده پروتئين محاسبه گرديد.در فاز سوم پرورش (از وزن 600 گرم تا 2000 گرم) در يك دوره 43 هفته اي انجام پذيرفت و مشابه فاز دوم پرورش ، كليه زيست سنجي ها انجام پذيرفت . در ارزيابي مقايسه مورفولوژيكي مولدين شاهد و دورگه 26 پارامتر مورفولوژيك و مريستيك مورد بررسي قرار گرفت و بر مبناي پارامترهاي انفرادي و يا نسبي مقايسه ها بر مبناي آماري مورد محاسبه قرار گرفت.جهت ارزيابي ژنتيكي و تعيين تفاوت مولكولي بين ماهيان شاهد و دورگه از روش ميكروستلايت استفاده گرديد كه پس از استخراج DNA از باله مولدين و بچه ماهيان شاهد و دورگه از 10 جفت پرايمر اختصاصي تاسماهيان (Afug56 ، Afug63 ، Afug241 ، Afug229 ، ox27 ، Afug686 ، Afug195 ،Afug 12 ، IS68 ، Afug160) استفاده گرديد و محصول PCR بر روي ژل پلي آكريلاسيد 6 % الكتروفورز و سپس رنگ آميزي نيترات نقره انجام گرفت و الل ها بر حسب جفت باز (bp) مورد سنجش قرار گرفت.براي مقايسه سيتوژنتيكي و تعيين تعداد كروموزوم هاي ماهيان شاهد و دورگه، كشت گلبول هاي سفيد خون ماهيان گسترش كروموزمي از نمونه هاي والدين و بچه ماهيان تهيه و با گيمسا رنگ آميزي و در زير ميكروسكوپ مورد سنجش قرار گرفت. جهت ارزيابي رشد گنادهاي جنسي با استفاده از روش لاپراسكوپي دوربين دار (مدل M-CAM1700) مرحله جنسي و همچنين وضعيت گناد و بيضه 34 عدد از ماهيان شاهد و دورگه مورد سنجش قرار گرفت.در اين تحقيق نتايج بررسي رشد نشان داد كه در فاز 1 پرورش بعد از گذشت 10 هفته تغذيه ، اختلاف معني دار آماري (P<0.05) در بين دورگه ها و شاهد وجود داشت كه بيشترين سرعت رشد را لارو تاسماهي سيبري وسپس دورگه ماده سيبري و نر تاسماهي ايراني و پس از آن دورگه نوع دوم و در مرحله كند رشد لارو تاسماهي ايراني قرار داشت. در فاز دوم پرورش نيز سرعت رشد تاسماهي ايراني در مقايسه با تاسماهي سيبري و دورگه ها كمتر بود. تاسماهي سيبري شاهد در طي 330 روز دوره پرورش متوسط افزايش وزن 4/1 گرم در روز و تاسماهي ايراني 3/1 گرم در روز افزايش رشد داشت. در حاليكه دورگه تاسماهي سيبري ماده و تاسماهي ايراني نر متوسط رشد روزانه 5/1 گرم و دورگه نوع دوم كمترين رشد را داشت.نتايج فاز 3 پرورش بيانگر سرعت رشد متفاوت در سنين مختلف ماهيان مورد بررسي بود. به نحوي كه سرعت رشد روزانه تاسماهي سيبري شاهد 5/4 گرم در روز در حاليكه براي تاسماهي ايراني شاهد 6/2 گرم در روز بود و تاسماهي سبري در طي 47 هفته از 655 گرم به 2016 گرم رسيد ولي تاسماهي ايراني در طي اين مدت از 628 گرم به 1413 گرم رسيد. دورگه نوع I يعني دورگه حاصل از تلاقي تاسماهي سيبري ماده با تاسماهي ايراني نر از سرعت رشد بالايي برخوردار بوده كه از وزن 655 گرم به 2298 گرم رسيد ولي دورگه نوع II عكس آن در طي مدت مشابه از 640 گرم به 1680 گرم رسيد.درجمع بندي ارزيابي رشد مي توان اعلام نمود كه دورگه حاصل از تلاقي تاسماهي سيبري ماده با تاسماهي ايراني نر بالاترين سرعت رشد را نسبت به ماهيان شاهد و دورگه ديگر داشت و اين دستاورد مهم ميتواند بعنوان گام موثري در توليد گوشت و خاويار تاسماهيان به صنعت آبزي پروري معرفي مي‌گردد.در ارزيابي صفات مورفولوژيك از 26 شاخص اندازه گيري شده در 18 شاخص اختلاف معني دار دارند (P<0.05) كه بيانگر آن است كه تيمارها به خوبي قابل تفكيك هستند به نحوي كه تاسماهي سيبري پوزه بلندتر نسبت به تاسماهي ايراني و دورگه ها در حد پوزه متوسط مي‌باشد.در مقايسه نسبي صفات مشخص شده از بين 9 نسبت اندازه گيري شده در 7 مورد اختلاف معني دار (P≤0.5) مشاهده گرديد.در ارزيابي مولكولي با استفاده از پرايمرهاي مايكروستلايت در مجموع 400 نمونه DNA از ماهيان شاهد و هيبريد مورد مطالعه قرر گرفت كه در اين ميان 363 الل در بين ماهيان شاهد و 421 الل در نمونه هاي هيبريد و در مجموع 784 الل شمارش گرديد. در اين بررسي 19 الل با اندازه هاي متفاوت در هيبريدها ظاهر شدند كه كمترين اندازه اللي (120 جفت باز) در پرايمر AOX27 و بيشترين اندازه اللي (400 جفت باز) در پرايمر AFUG229 ظاهر شدند و همين طور در بين كليه پرايمرها، پرايمر AFUG160 و AFUG195 با دو الل و پرايمر AFUG68b با 7 الل متفاوت كمترين و بيشترين تعداد الل را دارا بودند. الگوي باندها در 66 جايگاه نمونههاي شاهد و 65 جايگاه نمونههاي هيبريد مونوپلوئيد، در 77 جايگاه نمونههاي شاهد و 73 جايگاه نمونههاي هيبريد ديپلوئيد، در 31 جايگاه نمونههاي شاهد و 39 جايگاه نمونههاي هيبريد تريپلوئيد، در 9 جايگاه نمونههاي شاهد و 12 جايگاه نمونههاي هيبريد تتراپلوئيد، و در 1 جايگاه نمونههاي شاهد و 3 جايگاه نمونههاي هيبريد پنتاپلوئيد و در 8 جايگاه نمونههاي شاهد و 6 جايگاه نمونههاي هيبريد مبهم بودند. از بين 10 جفت پرايمر 7 جفت پرايمر ديسوميك و 3 پرايمر Afug241 ، Afug686 و Aox27 حالت تتراسوميك نشان داد و پرايمرهاي Afug160، IS68، Afug12، Afug686، Aox27 و Afug63 توارث الل ها را بخوبي نشان داد كه بيانگر كارآئي روش مايكروستلايت است . ارزيابي جنسيت تاسماهيان در تيمارهاي مختلف و همچنين مرحله رسيدگي جنسي گناد با استفاده ازروش لاپراسكوپي نتايج نشان داد كه از 9 عدد تاسماهي ايراني مورد بررسي، 4 عدد تاسماهي ايراني ماده و 5 عدد تاسماهي ايراني نر در مراحل رسيدگي جنسي 2 و 3 قرار داشتند. همچنين در بررسي 8 عدد تاسماهي سيبري 4 عدد تاسماهي سيبري ماده و 4 عدد نر در مراحل رسيدگي جنسي 2، 3 و 4 بودند. نتايج وضعيت گناد جنسي 7 عدد دورگه تاسماهي ايراني ماده و تاسماهي سيبري نر، تعداد 5 عدد تاسماهي دورگه نر و 2 عدد تاسماهي دورگه ماده در مراحل 3 و 4 رسيدگي جنسي را نشان داد. در بررسي 10 عدد دورگه تاسماهي سيبري ماده و تاسماهي ايراني نر، تعداد 3 عدد تاسماهي دورگه ماده، 6 عدد تاسماهي دورگه نر و 1 عدد تاسماهي دورگه (گناد دفرمه) مشخص گرديد.در ارزيابي سيتوژنتيك ماهيان مورد بررسي بر اساس تعداد كروموزومهاي شمارش شده در 30 عدد پلاك متافازي انجام شده از 6 ماهي مورد آزمايش مشخص گرديد تعداد كروموزوم هاي ماهيان حاصل از تلاقي بين تاسماهي ايراني و تاسماهي سيبري داراي 10±250=n2 كروموزوم هستندكه تمام ماهيان شاهد و دورگه 240 عدد كروموزم دارند و همانند والدين خود تتراپلوئيد هستيد.در جمعبندي مي توان اعلام نمود كه اين تحقيق موفق به معرفي دورگه جديدي براي توليد گوشت و خاويار به صنعت آبزي پروري شد و با توجه به اسامي علمي والدين استفاده شده جهت توليد دورگه تاسماهي سيبري ماده و تاسماهي ايراني نردورگه فوق بنام (SiPer ) نام گذاري مي‌گردد كه Si آن برگرفته از Siberian sturgeon و حروف Per برگرفته از Persian sturgeon ميباشد
چكيده انگليسي :
In order to introduce a new sturgeon hybrid to aquaculture industry, the possibility of hybrid production by crossing between Siberian and Persian sturgeons and its comparison with its pure parents using morphometric, molecular, cytogenetic and growth performance were conducted. For this purposes eggs and sperms of two pairs of Persian and Siberian sturgeon were collected and reciprocal crosses with 4 treatments were conducted. In treatment 1, Persian sturgeon as control (male and female of Persian sturgeon), treatment 2 (as type I hybrid) from crosses of male Persian sturgeon with eggs of female Siberian sturgeon in treatment 3 (type II hybrid) using crosses between male Siberian sturgeon and female Persian sturgeon and finally treatment 4 by crossing male and female of Siberian sturgeon were used.For each treatment 200 gr. of eggs were fertilized with one ml. of sperm and morphological, meristic parameters of parents and offspring were recorded. For growth comparison of fingerlings of control and hybrids in 3 different phases were measured. In phase (I), larvae rearing from 46 mg. up to 6600 mg. were conducted for a period of 10 weeks. Samples were collected once every two weeks and biological parameters were recorded.In rearing phase II for a period of 330 days, growth comparison were conducted for fish from 6.5 gr. to 750gr. and biological parameter were recorded once every month, where daily growth rate (gr./day), FCR, Specific growth coefficient (percentage per day), increase of body weight, food efficiency and protein efficiency ration were analyzed.In rearing phase (III), from 600 gr. to 2000 gr. for a period of 43 weeks, similar to phase (II) all biological parameters were analyzed, where 26 morphometric and meristic parameters of pure and hybrid parents and offspring were compared both for individual and ratio status of parameters.For genetic analysis and variation between control and hybrid specimens the microsatellite analysis were conducted. For this purposes, genomic DNA were extracted from fin tissues of brood stocks and fingerlings and 10 pairs of specific primers (Afug 56, Afug 63, Afug 241, Afug 229, OX 27, Afug 686, Afug 195, Afug 12, IS 68 and Afug 160) were used. Then PCR Products were electrophoresed on 6% polyacrylamide gel and then were stained with Nitrate silver and alleles were evaluated based on its length (base pair).Cytogenetic analysis and number of chromosome of control fish and hybrid were compared using white blood cell culture method and chromosome spread of parents as well as offspring were prepared by Gimsa staining and were visualized under light microscope.For sexual gonad development, laparoscopic method with light camera (Model M-CAM 1700) were used to differentiate 34 pieces of control and hybrid fish and gonad status of ovary and testis were analyzed.In present investigation the results indicate that, in phase (I) of larvae culture, a significant differences were observed after 10 weeks of feeding (p≤ 0.05) in hybrid and control groups. Maximum growth rate were observed in Siberian sturgeon larvae, followed by type I hybrid, type II hybrid and Persian sturgeon larvae.In phase (II) , growth rate of Persian sturgeon were lower than Siberian sturgeon. For period of 330 days of rearing periods, the control Siberian sturgeon had 1.4gr. weight increment per day, while Persian sturgeon had only1. gr./day. However the hybrid type (I) had an average daily growth of 1.5gr/day and lower growth performance were observed in type II hybrid with daily growth of 1.5 gr./day.In phase (III), growth rates were varied at different age group. The daily growth rate of Siberian sturgeon was 4.5gr/day, while is control Persian sturgeon was 2.6 gr/day. The Siberian sturgeon within 47 weeks of rearing grown from 655 gr. to 2016 gr., however Persian sturgeon for the same period reached from Siberian sturgeon with male’s Persian sturgeon had higher type II hybrid showed opposite results for the same growing period and reached from 640 gr. to 1680 gr.In conclusion of growth performance can be stated that the hybrid from crosses between female Siberian sturgeon with male Persian sturgeon presented highest growth rate in comparison to control hybrid. This excellent achievement can be considered as a big step toward sturgeon aquaculture for meat and Caviar production.In analysis of morphometric characters 26 parameters were investigated which in 18 parameters showed significant differences (p≤ 0.05) which indicate clear distinguish able of hybrid performance in compare with parents where Siberian sturgeon has longer snout compare to Persian sturgeon and its size are intermediate in hybrids. In relative ratio of characters, out of 9 characters totally 7 characters showed significant differences (p≤ 0.05).In molecular analysis using microsatellite primers totally 400 DNA samples of hybrid as well as the control fish were investigated. Totally 784 allele were detected in which 363 alleles were belong to control fish and 421 alleles in hybrid. In this study, 19 alleles with different sizes were observed in hybrids rang from (120bp) in Aox27 primers (400bp) in AFUG229 primers. In comparing of all primers, the primer AFUG160 and AFUG195 with 2 alleles and primer AFUG686 with 7 alleles showed the minimum and maximum allele numbers.The banding patterns were monomorphic in 66 loci of control fish and 65 loci of hybrids, and in 77 loci of control fish and 73 loci of hybrids were diploid in 9 loci of control fish and 12 loci of hybrid fish were tetraploid, in one locus of control samples and 3 hybrid samples were pentaploid and finally within 10 pairs of primers 7 sets were disomic, 3 primers (Afug241, Afug686, Aox27) were tetraploid and 6 primers of (Afug63, Aox27, Afug688, Afug12, Is68, Afug160) showed excellent allele heritability which indicate the high efficiency of microsatellite techniques. In evaluation of the status of gonad development as well as determination of sexual stages laprascopic method indicated that out of 9 samples of Persian sturgeon (4 females and 5 male) were in stage of 2 & 3 gonad development. Out of 8 Siberian sturgeon (4 males+4 females) stage 2, 3, 4 were detected. In 7 gonad samples of hybrid (Female Persian and Male Siberian) totally 5 male and 2 female were observed at stage 3 and 4 gonad development. In analysis of 10 samples of type II hybrid (female Siberian × male Persian) 3 female, 6 males and 1 deformetic were observed.Cytological studies on 30 metaphase palate from 6 fish samples showed that the number of chromosome in hybrid are as same as parents 2n=250±10 where all control and hybrids similar to its parents showed 240 chromosome.In conclusion, It can stated that, this study successfully introduced a new sturgeon hybrid for sturgeon farming both for meat and caviar production. Considering the common name of sturgeon parents used for production this hybrid, we call this hybrid as (Siper) where Si instant for Siberian sturgeon and Per comes from Persian sturgeon
كليدواژه :
دورگه , تاسماهي ايراني , تاسماهي سيبري , (SiPer) , آبزي پروري
اطلاعات نشر :
تهران ﻣﻮﺳﺴﻪ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻋﻠﻮم ﺷﯿﻼﺗﯽ ﮐﺸﻮر
مشخصات ظاهري :
مصور، جدول، نمودار
فروست :
ﺳﺎزﻣﺎن ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت، آﻣﻮزش و ﺗﺮوﯾﺞ ﮐﺸﺎورزي - ﻣﻮﺳﺴﻪ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻋﻠﻮم ﺷﯿﻼﺗﯽ ﮐﺸﻮر 53913
كليدواژه - جزئيات :
لينک به اين مدرک :
بازگشت