كليدواژه زبان طبيعي :
جداسازي , مفري , تشخيص , الكتروفورز , جداسازي , ژن , باكتري , گياهي , انتقال , ژن , ازت , انتروتوكسين , ماوراء بنفش , باكتريوسين , آندرسون , پلاسميد , آنتي بيوتيك , چندگونه , هامفري
چكيده :
وجود پلاسميد در باكتريهاي Salmonella SP,Esherichia coli Xanthomonas campestris PV. hederae Erwinia ananas ,Agrobacterium tumefaciens ,P. solanacearum P. syringae PV. syringae ,psedomonas avenae به كمك چند روش جداسازي پلاسميد مورد مطالعه قرار گرفت . استرين هاي باكتريايي بر روي محيط كشت مناسب خود بمدت 48-24 ساعت رشد داده شدند. سلولهاي باكتري در بافر TE سوسپانسيون گرديده تا جذب نوري آنها در طول موج 600 نانومتر برابر با 1/5 شد. سديم دو دسيل سولفات )SDS( به غلظت نهايي 1 درصد اضافه و لايزت 3 بار از سرنگ شماره 18 عبور داده شد PH . لايزت محتوي قطعات DNA كروموزومي با اضافه كردن سود 3 نرمال به 12/2 و بدنبال آن با اضافه كردن تريس 2 مولار، 7 PH= به 9-8/5 رسانده شد. سپس كلرور سديم 3 درصد و بدنبال آن يك حجم فنل اشباع از كلرور سديم 3 درصد اضافه گرديد و به آرامي به هم زده شد و سانتريفوژ گرديد. فاز مايع شفاف رويي جدا شده و فنل اضافي با اضافه كردن يك حجم كلرو فرم حذف گرديد. لايزت سانتريفوژ شده و فازرويي جدا گرديد. كلرور منيزيم و با فرفسفات سديم 0/15 مولار، 7 PH= و بدنبال آن 0/7 حجم اتانول خنك (سرد) اضافه و لوله ها بمدت 12 ساعت در 20- درجه سانتيگراد نگهداري شدند. پس از سانتريفوژ در دور پايين و بدنبال آن حل رسوب حاصل در EDTA ، بمدت 24 ساعت در بافر TES دياليز شدند... خلاصه مندرجات : ... فهرست جداول +فهرست اشكال +بررسي نوشته ها+كليات +جايگاه زيستي باكتريها و منشا پلاسميدها+كاربرد و اعمال پلاسميدها+تشخيص و جداسازي پلاسميدها+مواد و روشها+نتايج و بحث ...
