كليدواژه زبان طبيعي :
گلوكوكورتيكوييدها , كورتيزول , تترازوليوم , آنتي بادي ها , اندازه گيري , ايمني (پزشكي ) , ايمن سنجي آنزيمي , سرم خون , خرگوش , بخش بيوشيمي باليني , پنيسيليناز
چكيده :
چندين مورد ايمونواسي آنزيمي )EIA( براي اندازه گيري كورتيزول گزارش شده است . اينها آنزيمهاي مختلفي نظير آلكالن فسفاتاز و بتاگالاكتوزيداز و HRP را شامل مي شود. اخيرا پنسيليناز به عنوان آنزيم ماركر براي اندازه گيري تعدادي از استروييدها گزارش شده است . در اين مطالعه از پنسيليناز(6.2.5.3 )EC براي اندازه گيري كورتيزول در نمونه هاي سرم استفاده شد. مشتق 3 O-CMO-CORTISOL- تهيه شد. اين مشتق به BSA و نيز پنسيليانز كونژوگه گرديد. كونژوگه اول براي توليد آنتي بادي در خرگوش سفيد نيوزلند و بعدي بعنوان TRANCER در سنجش بكار مي رود. خرگوشها به روش MULTI-INTRADEMAL با دوز پايين ايمونيزه شدند، تيتر آنتي سرم بعد از يك دوره 75 روزه پس از اولين تزريق به 1:1000 و تيتر TRACER 1:500 رسيد. اين آنتي سرم ها و واكنش متقاطع قابل ملاحظه اي با استروييدهاي ديگر نداشتند (حداكثر+4 با 11 - داكسي كورتيكواسترون ). سيستم سنجش هومولوگ براي اندازه گيري كورتيزول در سرم از حساسيت و ويژگي خوبي برخوردار است . منحنهاي استاندارد در بافر PBS و سرم استريپ شده با معرفهاي رنگي و شرايط حرارتي متفاوت بدست آمد. از دماي 60 به مدت 30 دقيقه براي آماده سازي نمونه ها در تمامي سنجشهاي استاندارد و اندازه گيري كورتيزول در نمونه هاي افزوده شده به سرم ، (90-110)+است . ...