عنوان :
استفاده از آغازگرهاي اختصاصي در واكنش زنجيره اي پلي مراز PCR در تشخيص سريع عامل بيماري پژمردگي باكتريايي سيب زميني
پديدآورندگان :
تقوي محسن نويسنده , غياثي ماندانا نويسنده
نام دانشگاه :
دانشگاه شيراز
كليدواژه زبان طبيعي :
واكنش زنجيره اي پلي مراز بيماري پژمردگي باكتريايي سيب زميني آغازگرهاي اختصاصي بيماريهاي گياهي كشاورزي رده كشاورزي
چكيده :
سيب زميني يكي از محصولات غذايي مهم دنياست . در ميان عوامل بيماريزايي كه سيب زميني را آلوده مي سازد بيماري پژمردگي باكتريايي خسارت زيادي را به اين محصول وارد مي كند. توانايي رديابي آلودگي پنهان به باكتري عامل بيماري Ralstonia solanacearum به دليل قدرت بقاء طولاني آن در حالت زندگي پوده زي در خاك بدون ميزبان گياهي و ايجاد آلودگي بدون علايم در سيب زميني گوجه فرنگي موز و زنجبيل جهت جلوگيري از گسترش غده هاي آلوده به مناطق آري از بيماري مهم مي باشد. در اين تحقيق از روش PCR براي دريابي باكتري مذكور درعصاره خام غده هاي سيب زميني ونشاء گوجه فرنگي و عصاره خاك بدون جداسازي باكتري و انجام آزمون هاي بيوشيميايي استفاده گرديد. آستانه حساسيت آغازگرهاي به كار گرفته شده نيز در هر مرحله مورد بررسي قرار گرفت . دي ان آ DNA هدف با جوشاندن سوسپانسيون باكتري يا با استفاده از جوشاندن عصاره خام غده سيب زميني و ساقه گوجه فرنگي حاوي باكتري از گياهان مايه زني شده آزمايشگاهي و آلوده مزرعه اي به دست آمد. براي بهينه سازي روش PCR اثر مقادير مختلف TAq,MgCl2 پلي مراز نيز مورد بررسي قرار گرفت . محيط كشت سوكروز پپتون آگار SPA در جداسازي اوليه باكتري از ريشه ، غده ساقه گياهان و محيط كشت هاي PCCG و DMDA جهت جداسازي باكتري از خاك مناسب بودند.
