عنوان :
تخليص a1 آنتي تريپسين از پروسه پالايش پلاسماي انسان و طراحي توليد آن در مقياس نيمه صنعتي
پديدآورندگان :
خاني محمدتقي نويسنده , قدس خواه دريايي مريم نويسنده
نام دانشگاه :
دانشگاه تهران
كليدواژه زبان طبيعي :
خالص سازي صاف كردن پلاسماي خون توليد آلفا - يك - آنتي تريپسين نفخ طرح آزمايشي بيوشيمي باليني رده پزشكي رده علوم پايه
چكيده :
آلفايك - آنتي تريپسين a 1 AT= alpha- one - antitrypsin مهمترين مهار كننده پروتياز الاستاز نوتروفيلي در بافت ريه است . كمبود a 1 AT پلاسما معمولا به آمفيزم پيشرفته و در مواردي به بيماري كبدي منجر مي گر. در حال حاضر از a 1 AT خالص شده از فراكشن هاي پلاسما در بيماران با آمفيزم ريوي به صورت جايگزين درماني استفاده مي شود لذا طراحي توليد انبوه اين پروتيين از پلاسما از اهميت خاص برخوردار است . از آنجايي كه امكان توليد نيمه صنعتي اين پروتيين در پروسه پالايش پلاسما از منبع قابل دسترس و ارزان موجودبود. توانستيم a1AT را از خمير IV-4 فراكشن كوهن در يك مقياس آزمايشگاهي با به كار بردن كروماتوگرفاي تبادل يون روي ژل DEAE CL - 6B سفارز و كروماتوگرافي ژل فيلتراسيون روي سفاكريل 200 S - تخليص كنيم ، و بدين ترتيب a 1 AT با ضريب تخليص 1228 و بازده 18 درصد بدست آمد. حفظ ويژگيهاي بيوشيميايي و فعاليت بيولوژيك پروتيين با روشهاي ايمونوشيميايي و سنجش آنزيماتيك در هر مرحله ارزيابي شد. همچنين با روشهاي HPLC, SDS-PAGE خلوص پروتيين مورد تاييد قرارگرفت و بدين ترتيب با خالص نمودن 1 AT از خمير IV-4 توانستيم امكان دسترسي به اين پروتيين درماني را فراهم آوريم .