عنوان :
ميكوويروس هاي Fusarium oxysporum f. sp. melonis F.oxysporum و جدايه هاي از فراريشه Cucumis melo
پديدآورندگان :
بني هاشمي ضياءالدين نويسنده , شرزه اي عباس نويسنده
نام دانشگاه :
دانشگاه شيراز
كليدواژه زبان طبيعي :
ميكوويروس هاي }Fusarium oxysporum f.sp.melonis{ جدايه هاي }F.oxysporum{ از فراريشه }Cucumis melo{ رده كشاورزي كشاورزي
چكيده :
دويست وپنجاه وشش جدايه Fusarium oxysporum از بافت ساقه ، طوقه و ريشه گياهان خربزه و طالبي از مناطق عمده كشت اين محصولات از نظر بيماري زايي ، وجود ميكوويروس و تاثير آن بر قارچ بررسي شدند. آزمون بيماري زايي بر روي ارقام حساس طالبي با مايه زني به روش فرو بردن ريشه در سوسپانسيون به علظت ... كنيديوم در ميلي ليتر انجام شد. توده ميسليومي 187 جدايه بيماري زا F.oxysporum f.sp. melonis )Fom( و 69 جدايه غيربيماري زا در محيط مايع عصاره سيب زميني دكسترز بدست آمد. با استفاده از كروماتوگرافي در ستون سلولز CF-11 ، مولكول هاي dsRNA جداسازي شدند. تنها پنج جدايه )A-E( حاوي سه تا ده قطعه dsRNA به اندازه هاي /7. تا 3/2 كيلو جفت باز بودند. ماهيت دولاي مولكول هاي RNA با استفاده از تيمار آنزيمي با RNase و DNase تاييد شد. تمام جدايه هاي حاوي dsRNA بيماري زا بودند. تلاش براي حذف مولكول هاي dsRNA از قارچ با جداسازي و كشت نوك ريسه با تيمار با سيكلوهگزاميد تا غلظت 200 ميكروگرم در ميلي ليتر، توام با نگهداري در دماي 32 درجه سانتيگراد ناموفق بود. وجود مولكول هاي شناسايي شده dsRNA اثر قابل تشخيصي بر مرفولوژي و بيماري زايي Fom نداشت . از تشكيل هتروكاريون بين دو جدايه Fom (كه قبلا VCG آنها 0134 تعيين شده بود) براي بررسي انتقال مولكول هاي dsRNA و مطالعه اثر آن ها بر قارچ ميزبان استفاده شد. نژاد اين جدايه ها نيز به عنوان يك نشانگر سيتوپلاسمي براي تفكيك آن ها از هم مورد استفاده شده قرار گرفت . جدايه دهنده (جدايه D ، حاوي چهار قطعه )dsRNA به نژاد 2-1 و جدايه گيرنده )R( ، بدست آمده از منطقه گرمسار، به نژاد 1 تعلق داشت . از طالبي رقم شهد شيراز، كه به نژاد 1 مقاوم و به نژاد 2-1 حساس بوده ، به عنوان ميزبان افتراقي استفاده شد. موتانت هاي نيت بر روي محيط حداقل ، حاوي 15 گرم بر ليتر KClo3 و 1/6 گرم در ليتر آسپارژين بدست آمد. مكمل سازي بين كلاس هاي فنوتيپي مختلف موتانت هاي نيت جدايه هاي D و R در محيط حداقل انجام شد. از ناحيه هتروكاريوتيك قطعات ميسليومي جدا و به محيط آب آگار منتقل شد و چندين نوك ريسه تهيه گرديد. كلني هاي حاصل از نوك ريسه هاي از نظر بيماري زايي بر روي رقم شهد شيراز و از لحاظ وجود مولكول هاي dsRNA به روش كروماتوگرافي با سلولز CF-11 بررسي شدند...
