عنوان :
همسانه سازي ژن اينترلوكين - 4 و بيان آن در پري پلاسم باكتري E.coli با استفاده از وكتور بيان كننده پروكاريوتيك
پديدآورندگان :
برزگري ابوالفضل نويسنده , محمدي، ابوالقاسم‌ف حجازي، محمدسعيد نويسنده
نام دانشگاه :
دانشگاه تبريز
كليدواژه زبان طبيعي :
اينترلوكين - 4، بيان همسانه سازي رده علوم پايه
چكيده :
... در اين تحقيق ، هدف دست يابي و تكثير IL-4 توسط تكنيك PCR و سپس تظاهر پروتيين اينترلوكين -4 در پري پلاسم باكتري E.Coli است . بدين منظور جفت پرايمرهاي اختصاصي از روي توالي IL-4 طراحي و در انتهاي آغازگرها سايت آنزيمي براي آنزيم هاي BamHI و آنزيم XhoI قرار داده شد. واكنش زنجيره اي پلي مراز انجام شده و قطعه مورد نظر تكثير داده شد. اين قطعه بعد از انجام الكتروفورز ژل آگارز، از ژل جداسازي شد. سپس در داخل پلاسميد pTZ75R/T همسانه سازي شد. و در داخل باكتري اشرشياكلاي سوش DH5a تراريزش شد . باكتريهاي تراريخته در محيط كشت جامد انتخابي (آمپي سيلين ، ماده القا كننده X-gal, IPTG كشت شده و سه نوع كلون باكتريايي بدست آمد. كلون هاي سفيد رنگ را از بين كلون هاي آبي رنگ انتخاب و كشت شبانه روز انجام شد. با استخراج حامل هاي نوتركيب و برش با آنزيم هاي BamHI و XhoI ، قطعه اينترلوكين - 4 رها شدند بطوريكه در دو انتهاي خود جايگاه چسبنده دارا بودند...
