مرکز منطقه ای اطلاع رساني علوم و فناوري - تهيه و تخليص آنزيم ليزوزيم از سفيده تخم مرغ .

چكيده :

آنزيم ليزوزيم }71.1.2.EC: 3{ يك آنزيم باكترويوليتيك مي باشد كه نخستين بار در سال 1922 بوسيله در برخي ايز مايعات بيولوژيك كشف گرديد. اين آنزيم داراي 129 اسيد آمينه و چهار پيوند ليستي درون زنجير مي باشد، وزن مولكولي ليزوزيم 15000 دالتون مي باشد. اين آزيم به آساني روي سوستراهاي با وزن ملوكول زياد عمل مي نمايد، ليزوزيم با هيدروليز پيوندهاي گليكوزيدي 4 - 1) 3 در اسكلت پل ساكاريدي }PEPTIDOGLYCAM{ باعث از بين رفتن ديواره باكتريها مي گردد. روش كار: 1- جمع آوري سفيده : تخم مرغ تخم مرغ و تعيين ميزان پروتيين 2- مخلوط نمودن با اتانل با درصدهاي مختلف دردماي پايين 3- سانترينوژ نمودن در }00004 PRM{ وجدا نمودن }SUPERMATENT{ و رسوب و سپس با فسفات بافر دياليز كرده و بعد ليوفيليز مي نماييم 4- اندازه گيري فعاليت آنزيم ليزوزيم : ابتدا 20 ميلي گرم از ديواره سلولهاي كشته شده ميكرب }MICROCCOCYS LYSODEIKTICM{ را در 90 ميلي ليتر فسفات بافر }M.51{ مولار }PHSB2{ حل نموده ، سپس 10 ميلي گرم كلر در سديم 1 درصد را به آن اضافه مي نماييم تا محلول شكل يكنواخت گيرد.