جنين زايي سوماتيكي از ريشه هاي مويين تراريخت شده با استفاده از آگروباكتريوم رايزوژنز در گياه (Portulaca oleracea L)

در این مطالعه امكان ایجاد جنین های سوماتیك از ریشه های مویین تراریخت گیاه خرفه (Portulaca oleracea L) بررسی شد. ریشه های مویین تراریخت پس از تلقیح ریز نمونه های برگی 14 روزه با آگروباكتریوم رایزوژنز سویه ی AR16834 به دست آمد. تأیید تراریختی ریشه ها توسط تكنیك PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن rol B صورت گرفت. به منظور كالوس زایی، ریشه های مویین در محیط MS حاوی تركیبی از هورمون های 2,4D و BA در غلظت های صفر، 0.5، 1 و 2 میلی گرم در لیتر كشت شدند. بیشترین فراوانی كالوس زایی به میزان 95 درصد در تركیب هورمونی 1 میلی گرم در لیتر 2.4D و 1 میلی گرم در لیتر BA به دست آمد. در محیط حاوی 2,4D و یا BA تنها كالوس زایی مشاهده نشد. كالوس ها به محیط MS جامد حاوی 0/2 میلی گرم در لیتر 2,4D و 0/4 میلی گرم در لیتر BA منتقل شدند. پس از 2 ماه این كالوس ها به كالوس های جنین زا تبدیل شدند و جنین های سوماتیكی قلبی شكل بر روی این كالوس ها به وجود آمدند.

In this study, the possibility of somatic embryogenesis from transformed hairy roots of porslane (Portulaca oleracea L.) was investigated. Hairy roots of purslane were obtained after inoculation 14 days leaf explants with Agrobacterium rhizogenes strain AR15834. PCR analysis with specific primers of rol B gene was performed to confirm the transformed hairy roots production. Hairy roots were cultivated on the MS medium containing 2,4-D and BA with concentrations of 0, 0.5, 1 and 2 mg/l in combination to produce callus. The highest frequency of callus formation was 95% on MS medium supplied with1 mg/l 2,4-D and 1mg/l BA. On MS medium supplied with only 2,4-D or BA, no callus was observed. The calli were transferred to solid MS medium containing 0.2 mg/l 2,4-D and 0.4 mg/lBA. After 2 months these calli changed to embryogenic calli and heart-shaped embryos were generated on these calli